第十章紫外可见分析法研讨.pptVIP

例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？ 已知361nm处的百分吸光系数为207 解： * 2．标准曲线法 配制一系列浓度不同的标准溶液，在一定波长下分别测定吸光度A。 以A为纵坐标，浓度c为横坐标，绘制A-c标准曲线。 完全相同的条件下，测定被测溶液的吸光度， 并从标准曲线上找出对应的被测溶液浓度或含量。 Blank Standard Sample Sample 二、定量分析 * 示例 芦丁含量测定 0.710mg/25mL * 3．对照法 相同条件下配制样品溶液和标准溶液，在同一波长处测二者吸光度 例：精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL； 另配制对照液，精密称定对照品25.00mg ，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度？ 二、定量分析 * 注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时 * （二）多组分的定量方法 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 2．两组分吸收光谱部分重叠 3. 两组分吸收光谱完全重叠 二、定量分析 * 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下测定→分别按单组分定量 二、定量分析 * 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测cb 定量Ca 定量Cb 二、定量分析 * 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 （1）解线性方程组法 二、定量分析 * （2）等吸收双波长法 测定a，消除b的影响 步骤：1. 选择λ1和λ2 对于干扰组分b，λ1和λ2是等吸收波长； 对于a，两波长的吸光度之差足够大； 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 二、定量分析 * 步骤2. a的对照品溶液在λ1和λ2处测定吸光度，得 二、定量分析 b的对照品溶液在λ1和λ2处测定吸光度，得 样品溶液在λ1和λ2处测定吸光度，得 E1a和E2a * 二、定量分析 * 同理 消除a的影响，测b 二、定量分析 * （一）有机物的紫外吸收光谱 从紫外吸收光谱推断： a. 分子骨架 b. 发色团之间的共轭关系 c. 取代基的种类、位置和数目 1.饱和碳氢化合物 跃迁类型：σ→σ*,需很大能量 吸收峰位置：远紫外区，200～400nm无吸收 三、结构分析 * 2.含孤立助色团和生色团的有机化合物 1）含有孤立助色团 电子类型： σ 和n电子 跃迁类型： n→σ* 2）含有孤立生色团 电子类型： σ π和n电子 跃迁类型： n→σ*(190nm) π→π*（150-180nm） n→π*(275-295nm) 3.共轭烯烃 两个双键只隔一个单键成共轭大π键 跃迁类型及吸收峰位置： π→π* 较孤立双键能级差减少，吸收长移 三、结构分析 * 4.αβ-不饱和醛、酮、酸、酯 1）分子特点：C=O 与C=C共轭 2）跃迁类型及吸收峰位置： π→π* 200～260nm ε约10000 n →π* 310～350nm ε100 3）一般溶剂极性增加使π→π* 吸收红移（长移）使n →π*吸收蓝移（短移） 三、结构分析 * 5.芳香族化合物 （1）苯和取代苯 分子特点：环状共轭体系 跃迁类型和吸收峰位置： π→π* E1，E2，B三个吸收带，有取代基长移， B带精细结构简化 助色团取代基：产生n →π* ， E2，B吸收带长移， ε增大，溶剂极性增加，B精细结构简化或消失 生色团取代基： B带长移，E2带 和K带合并 三、结构分析 * （2）芳香杂环化合物 a.五元芳杂环化合物，吸收光谱与环戊二烯相似 只有π→π* ，无n→π* b.六元氮芳杂环化合物，与相应的芳环相似，增加n→π*， B带强度增大，精细结构简化。 呋喃 噻吩 吡咯 环戊二烯 三、结构分析 * （二）有机物结构