单离子束时间分辨技术.docVIP

单离子束时间分辨技术概述 基于现有单离子束流技术，采用时间分辨光子检测技术，研制离子束辐照生物技术研究系统。系统建成后，其主要任务是检测离子辐照细胞所产生的瞬态荧光，获取荧光光谱、荧光寿命等特征信息。现有离子束辐照生物装备的荧光检测技术，都是基于荧光强度，不具备信号的时间分辨功能。本项技术可以研究离子-生物体相互作用的早期信息、动态过程和机理，研究离子-蛋白质相互作用、蛋白质分子之间相互作用、分子结构和动力学 FRET 等-生物体相互作用的早期信息、作用机理等方面研究甚少，很多问题还未涉及，其主要原因是缺乏相应的技术手段。本项目采用时间分辨荧光检测技术，弥补了所述的空缺。事实上，在离子注入到细胞的那一刻开始，到终点生物学效应的形成和发展，时间跨越10-19～109秒，其间包括物理、化学和生物学等多个过程。荧光寿命是实验材料固有的物理量，不受外界激发条件变化、荧光团浓度或光漂白等因素的影响，只与荧光团所处的微环境相关，可以对标记分子所处微环境中的许多物理参量、生化参量、离子浓度 如钙离子浓度等 、溶液疏水性等重要参量进行检测和分析。 整个系统的功能结构分两部分，一是单离子发生系统，另一是单光子检测系统（即时间分辨检测系统）。前者是已有装置，后者即为本项目所要组建的系统，这是项目的核心部分。 技术路线：参考下图。首先建立具有时间分辨能力的单光子检测系统，然后和现有单离子束系统进行功能联接。单离子束系统产生离子束，生物样品受离子辐照时产生荧光，荧光分别导入单光子检测系统、光谱仪和CCD。光谱仪和CCD 功能方块图 技术结构图 的作用见后面项目内容中的说明。用探测器探测注入到样品中的离子信号，此信号同时作为单光子系统工作的触发信号，从而实现了两个系统的功能对接。系统集成后，对现有控制软件进行扩展和调试。最后进行生物样品实验，测试荧光信号的时间分辨能力。单光子检测有几种不同的技术方法，本项目拟采用时间相关单光子计数法（TCSPC），TCSPC方法具有灵敏度高、动力学线性响应范围宽等特点，是目前广泛使用的方法。 本项目的结构和功能是显而易见的。简单地说，就是在现有单离子发射系统上增加单光子检测系统，但需要扩展现有的控制软件，并进行两系统的逻辑对接和调试。二者的有机集成，可以预期具有较为广泛的应用。由于已经具备单离子发射系统，而单光子检测系统也已成熟，因此，研制经费体量是可以承受的。 CAS-LIBB单离子束是目前我国唯一的一台先进的辐照装置，其最低可单独发射一个离子，最多可连续可发射离子，可按精确的离子数目来设定辐照剂量，并具有自动识别细胞、单离子自动精确定位样品等技术功能。 离子计数 高清 显微镜 CCD 时间分辨 荧光测量系统 电脑控制中心 荧光分析软件 扫描 单色仪 激发光源 单离子束 样品 荧光 光谱仪 荧光 定位控制 探测器 样品图像信号采集和控制 选定波长 半透半反镜 剂量控制 荧光 触发