免疫学检测培训1期研讨.pptxVIP

免疫学检测发展阶段 杨子乾 免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段，由于其可以利用同位素、酶、化学发光物质等对检测信号进行放大和显示，因此常被用于检测蛋白质、激素等微量物质。 我国免疫学检测的发展主要分为以下几个阶段 化学发光免疫检测（CLIA） 酶联免疫学检测（ELISA） 放射免疫学检测（RIA） 70年代 80年代 90年代 21世纪 一、免疫学检测 二、中国免疫诊断现状1、放射免疫法 中国 国际（欧美为主） 兴起于20世纪70年代，现仍普遍使用于县级以上医院 产品处于衰退期 厂商试剂与仪器共同开发,试剂基本系列化 兴起于20世纪60年代，现已基本退出临床应用 产品生命周期已终结 厂商试剂与仪器共同开发,试剂基本系列化 2、酶联免疫法 中国 国际（欧美为主） 兴起于20世纪80年代，现仍普遍使用于各级临床机构，为我国临床免疫诊断的基本方法 产品处于成熟期 厂商试剂与仪器共同开发,试剂尚未系列化 兴起于20世纪70年代，现仍在临床应用 产品处于衰退期 厂商试剂与仪器共同开发,试剂基本系列化 3、化学发光免疫法 中国 国际（欧美为主） 进入于20世纪90年代，现个别较大医院开展个别项目 产品处于导入期或成长期 无厂商开发生产，基本依赖进口 兴起于20世纪80年代，现已被临床普遍使用为临床免疫诊断的支柱方法 产品处于成熟期 厂商试剂与仪器共同开发,仪器自动化程度高，试剂系列化状态好 化学发光 酶联免疫 放射免疫 测量精度 定量 定性/半定量 定量 灵敏度 10-19 10-9 10-12 测量范围 大于104 小于104 小于104 测量时间 短 长 很长 试剂稳定性 好 好 差 对环境影响 无 无 有放射性 化学发光免疫检测是临床检验的趋势 三、检测方法的比较 酶联免疫吸附剂测定法（ELISA），是以免疫学为基础，将抗原抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测 附：酶联免疫 根据检测样本与检测目的的不同可以设计出不同类型的ELISA方法 1、双抗体夹心法 2、双位点一步法 3、竞争法 4、间接法 应用于临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中 化学发光免疫测定（CLIA）亦称化学发光标记免疫测定，是用化学发光剂直接标记抗原或抗体（化学发光剂标记物），与待测标本中相应抗体或?抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应，通过磁场把结合状态（沉淀部分）和游离状态的化学发光剂标记物分离开来，然后加入发光促进剂进行发光反应，通过对发光强度的检测进行定量或定性检测 。 附：化学发光免疫 化学发光免疫分析法的优点 1、灵敏度高 2、光信号持续时间长 3、分析方法简便快速 4、结果稳定、误差小 5、安全性好及使用期长 附 降钙素原PCT与C-反应蛋白CRP的关联与比较 降钙素原（PCT）是血清降钙素（CT）的前肽物质，是由116个氨基酸组成的糖蛋白质，在正常生理情况下，由甲状腺C细胞分泌产生。健康人血液中的PCT浓度非常低，小于0.05ng/ml。在炎症刺激特别是细菌感染或脓毒血症状态下，机体各个组织、多种细胞类型均可产生PCT并释放进入血液循环系统。 CRP是一种能和肺炎链球菌的荚膜C多糖结合，由5个相同的亚单位（23KD）以非共价键聚集形成的环状五聚体蛋白，分子量为115 KD，半衰期为19h，多由白细胞介素-6（IL-6）等炎性分子刺激肝脏细胞合成。正常人血清中CRP含量极微。 适应症与临床意义  PCT CRP ①细菌感染与病毒感染的鉴别诊断。 ②帮助脓毒症的早期诊断,评估疾病的严重程度及预后。 ③抗生素治疗效果的评估,指导临床抗生素使用。 ④手术和严重创伤患者细菌感染并发症监测。 ⑤胰腺炎鉴别诊断。 ①鉴别细菌感染与病毒感染 ②监控感病情变化及术后感染 ③预测心血管病危险 ④用