第十三章转基因动物探索.pptVIP

第十二章 转基因动物 转基因动物是动物基因工程在医学生物学研究中的突出成果。 近十年来，为分子遗传学、发育生物学、医学遗传学、肿瘤研究及优良经济动物的开发研究等多方面做出了很大的贡献。 Gordon等人首次成功地将含有HSV和SV40DNA片段的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内，得到了带有这种外源DNA顺序TGM。 1982年Palmiter等运用此法得到的所谓“超级巨鼠”,曾引起整个生物学界的轰动。 到目前为止，人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、牛等等大小动物。 从转基因动物所获得的资料几乎涉及医学遗传、肿瘤学、免疫学等的基因研究，还涉及生物药物的研究，基因治疗的开发研究等。 异体动物克隆---北山羊 二、转基因动物技术的主要步骤 获取外源目的基因 外源目的基因导入生殖细胞或胚胎干细胞 选择携带目的基因的细胞，选择体外培养系统和宿主动物 转基因胚胎的发育及鉴定 筛选所得的转基因动物 三、?转基因动物的技术路线 经典的技术路线? 目的基因 显微注射?已交配的 取出 移植 受体动物 妊娠供体动物 受精卵 输卵管 转基因动物 缺点：注入目的基因的命中率低，目的基因的整合率低，受精卵移植的受孕率低。 ?转基因动物的技术路线(续) ?整合胚胎移植的技术路线 转基因动物 受体动物子宫  目的基因 非手术 胚胎移植? 体外受精 体外培养 多细胞胚胎 检测 整合外源基因卵子 受精卵 或囊胚 的胚胎精子优点：受精卵的成活率高达90％以上，外源基因整合率高，提高受孕率。 ?转基因动物的技术路线（续） 核移植（克隆）的技术路线 目的基因 转基因动物? 导入? 动物胎儿成纤维细胞 妊娠  取核?动物 去核 重组的 体外培养 囊胚期 胚胎移植 卵细胞 受精卵 胚胎 受体动物子宫? 特点：体细胞核移植；核移植前导入目的基因。 ?转基因动物的技术路线（续） 整合卵受精的技术路线：? 目的基因 转基因动物  导入  逆转录病毒 妊娠  精子 感染  体外受精 胚胎移植  卵母细胞 成熟卵细胞 囊胚 受体动物子宫 ?特点：卵母细胞导入目的基因后再与精子受精。 四 转基因动物的制作方法 1、受精卵雄原核显微注射法 2、胚胎干细胞（ES细胞）法 3、逆转录病毒感染法 4、体细胞核移植法 5、精子载体法 6、YAC法 1、雄原核显微注射法 以单细胞受精卵为靶细胞，利用显微注射技