第十四章免疫治疗和诊断探索.ppt

第十五章 免疫学检测技术 一.抗原抗体反应的原理 二.抗原-抗体反应的特点 沉淀反应中抗原和抗体的关系 二.抗原-抗体反应的类型和检测方法 （一）凝集反应 妊娠反应（+） 妊娠反应（+） 凝集反应图解 （二）沉淀反应 单向免疫扩散(single radial immunodiffusion) 单向免疫扩散试验 2.免疫琼脂双向扩散原理 双向免疫扩散试验 3. 免疫电泳 （三）免疫标记技术 1.酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) 酶联免疫吸附试验 1.酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA) 2.免疫印迹 检测HIV血清抗体： 免疫印迹 3.直接和间接免疫荧光 4.免疫胶体金技术 一.外周血单个核细胞的分离 梯度密度离心 三.淋巴细胞及其亚群分离 磁珠分离 流式细胞术 四.淋巴细胞功能测定 （二）B细胞功能测定 溶血空斑试验 总结 若需要得到淋巴细胞，将PBMC放入平皿，收集未吸附的细胞。 若要得到T细胞，可通过尼龙毛、密度梯度离心。 若要得到B细胞，可通过尼龙毛。 磁珠分离：通过磁珠与抗CD4交联、与细胞悬液反应、磁场吸引得到CD4T细胞。 （一）T细胞功能测定 （1）增殖试验: 用有丝分裂素(植物血凝素PHA，刀豆蛋白ConA等)激活T细胞，引起细胞增殖。