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2.实验检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质详解
实 验 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 三年4考 高考指数:★★★☆☆ 考纲 考情 【实验原理】 还原糖+斐林试剂 ___________ 脂肪+ 蛋白质+双缩脲试剂 _____ 50 ℃~65 ℃ 温水浴 苏丹Ⅲ染液 橘黄色 苏丹Ⅳ染液 _____ 红色 紫色 砖红色沉淀 【实验步骤】 1.还原糖的检测: 选材:含糖量较高、_______________的植物组织 结论:组织样液中含有可溶性_______ 刚配制的 斐林试剂 砖红色沉淀 白色或近于白色 还原糖 2.脂肪的检测: 方法一:花生种子匀浆+3滴苏丹Ⅲ染液→_______ 方法二: 取材:花生种子(浸泡,去掉种皮),将子叶切成薄片 ↓ 制片 ↓ 观察:先在___________下寻找已着色颗粒,再用___________ 观察 ↓ 结论:圆形小颗粒呈_______,证明有脂肪存在 ①取最薄的切片,放在载玻片中央 ②染色:滴2~3滴___________,染色3 min ③去浮色:加1~2滴体积分数为50%的_________ ④制成临时装片:滴一滴_______,盖上盖玻片 橘黄色 苏丹Ⅲ染液 酒精溶液 蒸馏水 低倍显微镜 高倍显微镜 橘黄色 3.蛋白质的检测: 选材与制备:蛋清稀释液或豆浆滤液 结论:组织样液中存在_______ 4 紫色 蛋白质 1.在检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的实验中,对于选材有什么要求? 提示:主要有两个方面的要求: (1)含量较高,如检测还原糖时宜选用苹果,苹果含大量还原糖,不能选择甘蔗、甜菜等,因为这两种实验材料中含蔗糖较高,蔗糖不具有还原性。 (2)颜色为白色或浅色。白色或浅色的材料可以避免材料本身的颜色遮盖反应结果,如检测还原糖时一般不选择西瓜,检测蛋白质时一般不选择血红蛋白等。 2.蔗糖溶液中加入斐林试剂后呈现什么颜色? 提示:蔗糖属于非还原糖,不与斐林试剂发生反应。观察到的现象不是无色,而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。 3.检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质的实验中,哪些实验需要加热?哪些实验需要用显微镜观察? 提示:(1)只有检测还原糖的实验需要加热,且实验中需要用温水浴加热,不能用酒精灯直接加热。 (2)只有检测脂肪的实验需要用显微镜观察,因为脂肪颗粒储存于细胞中,必须用显微镜观察。 4.用蛋清稀释液作为实验材料鉴定蛋白质,为什么一定要稀释到一定程度? 提示:如果不充分稀释蛋清液,与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不容易洗刷干净。 5.鉴定还原糖时使用的斐林试剂为何要现配现用? 提示:因为斐林试剂很不稳定,容易产生蓝色的Cu(OH)2沉淀,所以应将甲液和乙液分别配制,使用时现配现用。 6.斐林试剂与双缩脲试剂成分相同,但在使用时,斐林试剂甲液与乙液必须混合使用,而双缩脲试剂则先滴加A液,再滴加B液,请分析原因。 提示:两个实验的反应原理不同,所以使用方法不同。 (1)检测还原糖:反应原理是Cu(OH)2与还原糖反应生成砖红色的Cu2O沉淀,所以先将甲液和乙液混合生成Cu(OH)2后再与还原糖反应。 (2)检测蛋白质:反应原理是肽键在碱性环境中与Cu2+反应产生紫色络合物,所以先滴加A液的目的是制造碱性环境。 7.在还原糖、蛋白质和脂肪的检测实验中,加相应试剂检测之前,为什么要留出一部分组织样液? 提示:留出一部分组织样液的目的是与检测后的样液颜色作对比,以增强实验的说服力。 【应用点拨】本实验中应用的原理是颜色反应。发生颜色反应后,一方面观察颜色种类,推断被检测的物质种类;另一方面观察颜色的变化和深浅,推断被检测物质的变化和含量的多少。所以应从颜色种类、过程和深浅等方面,考虑该原理在实际中的应用。 根据不同物质的特定颜色反应,结合物质的来源,鉴别不同物质的种类 原理解读 生物组织中物质种类的鉴别 热点应用一 【典例1】为进一步确定来源不同的A、B、C、D、E五种物质(或结构)的具体类型,进行了下列实验,现象与结果如下: (1)各种物质(或结构)的性质、染色反应的结果,见下表: 注:+:有(溶解);-:无(不溶解);灰分指物质充分燃烧后剩下的部分。 - - - - - 碘液 + - + - + 双缩脲试剂 - - - + - 苏丹Ⅲ染液 - - - - - 斐林试剂 - - + - - 甲基绿染液 染色反应 - - + - + 灰分 + - + - + 水溶性 霉菌 棉花 蛙表皮 马肝 猪血 来源 E D C B A (2)A为红色,检测A的灰分后发现其中含有铁元素。 (3)将适量的E溶液加入盛有D的试管中,混合一段时间后,混合液能与斐林试剂发生反应,生成砖红色沉淀。 根
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