第2章DNA的复制、损伤和修复学案.ppt

（一）尿嘧啶糖基酶系统 （二） 错配修复 光修复酶(photolyase) UV 二、损伤修复 （一）光复活修复 ( photoreactivation repair) （二）甲基转移酶修复 （三）切除修复 这是细胞内最重要和有效的修复方式。 其过程包括去除损伤的DNA，填补空隙和连接。 主要由DNA-polⅠ和连接酶完成。 （三）切除修复 1. 碱基切除修复 UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅰ OH P DNA连接酶 ATP 2. 核苷 切除修复 三、复制后修复 （postreplication repair) 1. 大肠杆菌的重组修复系统 2. SOS修复 (SOS repair system) 当DNA损伤广泛难以继续复制时，由此而诱发出一系列复杂的反应。 修复特异性低，对碱基的识别、选择能力差。 通过SOS修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而DNA保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。 四、限制与修饰 限制：限制性内切酶切断外来的DNA 修饰：甲基化酶保护细胞自身的DNA 五、修复系统与药物 渥曼青霉素的作用机制： 抑制DNA损伤修复的蛋白激酶的活性，DNA修复能力减弱，增加多药耐药细胞对化疗药物的敏感性。 复习题 DNA哪些类型修复属于复制修复？ 尿嘧啶糖基酶系统如何对DNA进行修复？ 什么是损伤修复？包括哪些类型？ 什么是限制与修饰？ 抗肿瘤药物渥曼青霉素的作用机制。 * 端粒的复制(telomere) 指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。 端粒的功能： 维持染色体的稳定性 维持DNA复制的完整性 端粒的结构特点： 由末端单链DNA序列和蛋白质构成。 末端DNA序列是多次重复的富含G、C碱基的短序列。 TTGGGGTTGGGG… 端粒酶催化作用的爬行模型 四、特殊类型的复制 （一）线粒体DNA复制 (D环方式) dNTP DNA-pol γ D-环复制时需合成引物。mtDNA为双链，第一个引物以内环为模板延伸。至第二个复制起始点时，又合成另一个反向引物，以外环为模板进行反向的延伸。最后完成两个双链环状DNA的复制。复制中呈字母D形状而得名。 D环复制的特点是复制起始点不在双链DNA同一位点，内、外环复制有时序差别。 （二）单链环状DNA的复制 噬菌体DNA按滚环方式(rolling circle replication)复制 是某些低等生物的复制形式，如?X174和M13噬菌体等。 3?-OH 5?-P 5? 5? 5? 3? 3? 3? 3? 5 滚环复制 5 ?? 5? 3? 3? 5? 逆转录酶(reverse transcriptase) 逆转录(reverse transcription) 逆转录酶 （三）逆转录病毒的基因组复制 RNA DNA 逆转录病毒细胞内的逆转录现象: RNA 模板 逆转录酶 DNA-RNA 杂化双链 RNA酶 单链DNA 逆转录酶 双链DNA 核苷类似物 （AZT: 3’-叠氮胸苷） 非核苷类似物 HIV-1蛋白酶抑制剂 HIV与药物 复习题 复制(replication) 复制的一般特征 DNA复制相关的酶各自作用 DNA聚合酶，拓扑酶和连接酶催化3?,5?-磷酸二酯键生成的比较 原核细胞DNA复制的过程 真核细胞DNA复制的特点 线粒体DNA复制方式 噬菌体DNA复制方式 逆转录病毒基因组复制 抗HIV药物核苷类似物 的作用机制 DNA损伤 DNA Damage 第二节 一、DNA损伤类型 （一）内源性损伤 1．DNA复制错误 ?2．碱基本身存在互变异构体，形成错误的碱基配对 3. 自发的化学变化 脱嘌呤和脱嘧啶，成为无碱基位点。 ?4.氧化作用损伤碱基 （一）自发突变 （二）外源性损伤 1． 物理因素 ２．化学因素 　（1）碱基类似物　 　（2）碱基修饰剂 （亚硝酸、羟胺、烷化剂）　　　　　　　　　　 　（3）ＤＮＡ插入剂 （１）碱基类似物　 （2）碱基修饰剂（亚硝酸、羟胺、烷化剂）　 羟胺 烷化剂 　　　　　　　　　 （3）ＤＮＡ插入剂 补充知识： 碱基置换突变 （1）点突变：DNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。单点、多点；转换、 颠换 （2）碱基插入（base insertion) （３）碱基缺失（ base deletion) ２．移码突