肿瘤易感基因101对胃癌细胞血管形成影响及机制研究.pdfVIP

目录 中文摘要???????????????????????．I 英文摘要??????????????????????．．III 英文缩略词??????????????????????V ．．1‘---L_ 月lJ 吾?????????????????????????????．1 材料与方法??????????????????????2 1．实验材料????????????????????2 2一实验方法????????????????????2 讨{仑????????????????????????????????．．1 0 结论????????????????????????????????．．1 4 综述????????????????????????????????．．1 5 个人简介??????????????????????．．20 致谢????????????????????????????????21 万方数据 山两医科人学坝}：学位论史 肿瘤易感基因101对胃癌细胞血管形成的影响及机制研究 中文摘要 目的： 探讨肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101，TSGl01)对胃癌SGC7901细胞 血管形成的影响及可能的机制。 方法： 1．体内实验： 1．1．荷瘤实验：18只裸鼠随机分为3组，分别种植未转染组细胞、空质粒转染组细胞(空质 粒组)、TSGl01真核表达质粒转染组细胞(TSGl 01转染组)三种细胞，构建裸鼠荷瘤模 型。每只小鼠在接种细胞前称重，接种后每隔3同测小鼠体重和皮下移植瘤的最长径(a)和 最短径(b)，按公式V=a xb2x0．52计算肿瘤近似体积(mm3)。 1．2．裸鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)含量测定：采用ELISA法检测裸鼠血清中的 VEGF浓度。 1．3．裸鼠瘤组织中的VEGF、血管内皮生长因子受体(VEGFR)测定：对瘤组织VEGF、 VEGFR进行免疫组化染色及定量分析。 1．4．微血管密度计数(MVD)：参照Weidner方法进行，对血管内皮细胞表面的CD34分子 染色，以此为目标，先在低倍镜下(×40)扫视整个切片，寻找血管密度区，再在高倍镜(× 200)下计数染色的血管数目，结果用随机5个×200视野下血管数目的均数±标准差表 示，所得数据进行统计学分析。 2．体外实验： 2．1．成管实验：将密度一致的未转染组细胞、空质粒组细胞、TSGl01转染组细胞与人脐静 脉内皮细胞(HUVEC)共培养，观察并计数管样结构。 2．2．细胞培养液中VEGF含量测定：取三组培养液各lml采用ELISA法检测VEGF浓度。 结果： 1．体内实验： 1．1．荷瘤实验：TSGl01组裸鼠移植瘤生长速度明显快于空质粒组和未转染组，8周后 处死裸鼠取瘤体，计算肿瘤体积，TSGl01组裸鼠移植瘤瘤体体积(1．41士0．15)明显高于 空质粒组和未转染组(0．64士0．05，0．70+0．08)，差异有统计学意义。 1．2．裸鼠瘤组织中的微血管密度及血清中VEGF含量测定：TSGl01组荷瘤裸鼠瘤组织 微血管密度和血清VEGF水平均明显高于空质粒组与未转染组(11．16±2．31比5．33±1．63、 万方数据 山西医科人学坝1．学位论文 4．66±1．36，340．64±19．1 5比219．34±1 3．56、206．10±25．85，均P0．05)。 1．3．裸鼠瘤组织中的VEGF及VEGFR表达：TSGl01组荷瘤裸鼠瘤组织中VEGF、 VEGFR表达(0．548±0．032、0．345±O．042)明显高于未转染组(O．350±0．034、0．203|-0．030) 与空质粒组(0．327+0．020、0．206士0．036，均P0．05)。 2．体外实验： 2．1．成管实验：TSGl01组细胞促人脐静脉内皮细胞成管数目明显多于空质粒组与未转染组 (19．50±3．02比11．50±2．51、1134±1．63，P0．05) 2。2．细胞培养液中的VEGF测定：TSGl01组细胞VEGF分泌水平高于空质粒组与未转染组 (514．80±18．16比306．58±20．86、305．69±29．93，P0．05)； 结论：TSGl01高表达的SGC7901细胞可能通过上调VEGF的表达促进胃癌血管形成。 关键词：肿瘤易感基因101；血管形成；血管内皮生长因子；胃癌 万方数据 山西医科人学坝卜学位论文 The effect and mechanism of TSGl01 on the angiogenesis of gastric cancer cells Abstract objective：To investigate the effect and