中药成分对TGEV体外抑制作用及机制初步精编.doc

摘 要 猪传染性胃肠炎(swine transmissible gastroenteritis, TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(swine transmissible gastroenteritis virus, TGEV)引发的一种高度传染性猪疾病。该病毒感染可导致仔猪严重腹泻、厌食、呕吐、脱水、无力，两周龄以下仔猪死亡率更高，是危害养猪业的重要病毒之一[1]。为了探讨连翘苷等中药成分如何在猪面对传染性胃肠炎病毒能够发挥出怎样的作用与机制，明确中药成分如何在体外作用并成功达到抗病毒的疗效，本研究利用动物细胞培养技术，采用MTT比色法和细胞病变观察法相结合，筛选出抗TGEV活性较好的中药成分，将抗TGEV中药成分不同作用方式下在ST细胞上与病毒结合，根据细胞形态及病毒量的变化，明确中药材内抑制TGEV增殖整个完整的作用过程原理。同时对筛选出的中药成分进行复方组合，观察复方中药成分对TGEV的作用疗效，为抗TGEV的药物筛选提供依据。主要研究内容包括： 1. 药物活性筛选细胞模型的建立 对长满单层ST细胞的感染TGEV强毒株病毒，当细胞出现明显的病理变化时，采取通过RNA提取试剂盒来获得细胞病变后的总RNA，用cDNA第一链合成试剂盒生成新的cDNA，以所获得的cDNA作为PCR技术采用的模版进行DNA的复制与合成，经琼脂糖凝胶电泳，扩增出了条带大小约0.75 kb的特异性片段，