分子生物学 第二章（分子生物学B）.pptx

第二章基因与染色体本章内容第一节 DNA第二节基因第三节染色体第一节 DNA一、DNA的结构（一）一级结构概念：核苷酸的排列顺序连接键：3’,5’-磷酸二酯键骨架：磷酸+戊糖方向性：5 →3’ （二）二级结构1.DNA的双螺旋结构模型 两条多核苷酸单链组成 沿同一根轴平行盘绕方向相反 一条5’→3’，另一条3’→5’右手双螺旋 螺旋结构上有大沟和小沟（二）二级结构1.DNA的双螺旋结构模型 嘌呤和嘧啶位于螺旋内侧磷酸和脱氧核糖位于螺旋外侧以3’,5’-磷酸二酯键连接碱基环平面与螺旋轴垂直，糖基环平面与螺旋轴平行（二）二级结构1.DNA的双螺旋结构模型 螺旋横截面的直径约为2 nm相邻碱基平面之间的距离为0.34 nm每10bp形成一个螺旋，螺矩为3.4 nm（二）二级结构2.DNA双螺旋结构稳定性因素（1）碱基堆积力 碱基堆积力是使DNA结构稳定的主要因素。（2）氢键 稳定性与GC含量成正比（3）相反电荷的稳定作用（二）二级结构碱基间距（nm） 螺距（nm）螺旋直径（nm） 每圈bp数 类型 碱基倾角 10?11?122.0-2.37?2.55?1.8-1.840-1?19-20?9?0.34?0.23?0.383.32-3.4?2.46-2.53?4.56 B-DNA A-DNAZ-DNA B-DNA：相对湿度为92%时的DNA钠盐纤维A-DNA：相对湿度为75%以下时的DNA纤维Z-DNA：左手螺旋3.DNA二级结构的多样性（二）二级结构3.DNA二级结构的多样性（三）超螺旋结构1.定义：指闭合环状双链DNA在空间螺旋，并缠过自身中轴的结构。（三）超螺旋结构2.参数（1）连接数（L）：两股多聚核苷酸链相互缠绕在 一起的总环数。（2）缠绕数（T） ：双螺旋中两股单链相互缠绕的圈数。 （等于螺旋数）（3）扭曲数（W）：双螺旋沿超螺旋轴相互缠绕的圈数。 （等于超螺旋数）L= T + W（三）超螺旋结构3.拓扑异构酶（1）定义：能够调控DNA分子超螺旋水平的酶称为拓扑异构酶。（三）超螺旋结构3.拓扑异构酶（2）类型：TopI，TopII（三）超螺旋结构3.拓扑异构酶（2）类型：TopI，TopIITopoisomerasesBreakLKEnergyType I one strand ± 1 -Type II both strands ± 2+二、DNA的变性与复性（一）DNA变性1.定义：DNA分子中有序的双螺旋解离成无序单链的过程称DNA变性。（一）DNA变性2.增色效应指变性后DNA溶液的紫外吸收作用增强的效应。 （一）DNA变性3.Tm值（熔解温度） DNA双螺旋结构解开一半链时的温度。 与链长和G/C含量成正比。（二）复性（renaturation）1.定义指变性的DNA分子中两条彼此分开的多核苷酸链间碱基重新配对，形成双螺旋的过程。 （二）复性（renaturation）2.分子杂交指两条不同来源的核酸单链，因存在着碱基配对关系，从而通过氢键连接生成新的双链的过程。 （二）复性（renaturation）3. Southern 印迹（1）定义：利用分子杂交原理检测样品中特异DNA的一种分子生物学技术。（2）步骤：（七步）降解、电泳、变性、转膜、杂交、洗涤、显影（二）复性（renaturation）4. Northern印迹法（1）定义：利用分子杂交原理检测样品中特异RNA的一种分子生物学技术。（2）步骤：（五步）电泳、转膜、杂交、洗涤、显影第二节 基因一、概念（一）经典遗传学观点：（1）基因能自我复制；（2）基因是交换的最小单位；（3）基因是一个突变单位；（4）基因是一个功能单位。 第二节 基因一、概念（二）分子遗传学观点： 1.“一个基因一个酶”假说 1941年，Beadle和Tatum对根据红色链孢霉的大量研究提出的。 BeadleTatum第二节 基因一、基因的概念（二）分子遗传学观点：2.顺反子（Cistron）定义：通过顺反测验所定义的一个遗传单位，通常与基因是同义词。(1955, S.Benzer)Benzer第二节 基因二、基因的分类1.结构基因与调控基因（1）结构基因：编码非调控因子的任何RNA或蛋白质的基因。（2）调控基因：编码的产物具有调控其他基因表达的基因。第二节 基因二、基因的分类2.管家基因与奢侈基因（1）管家基因：维持细胞基本功能所需的组成性基因，它们在一个生物的所有细胞中都能表达。（2）奢侈基因：编码了特定组织和细胞所需的产物。二、基因的分类3.断裂基因在编码序列中间插入无编码作用的碱基序列，这类基因被称为断裂基因。 第二节 基因二、基因的分类4.重叠基因是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列。 第二节 基因二、基因的分类5.假基因与有功能的基因在核苷酸顺序组成上非常相似，却不具