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第十九章 气相 色谱分离的基本原理 使混合物中各组分在两相（固定相和流动相）间进行分配，当流动相中所含混合物经过固定相时，就会与固定相发生相互作用，由于各组分在性质和结构上的差异，不同组分在固定相中滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相中流出。 h. 区域宽度：用于衡量柱效及反映色谱操作条件下的动力学因素。通常有三种表示方法： 标准偏差 ：0.607倍峰宽处的一半。 半峰宽W1/2：峰高一半处的峰宽。W1/2 2.354 峰底宽W：色谱峰两侧拐点上切线与基线的交点间的距离。W 4 色谱流出曲线的意义： 色谱峰数 样品中单组份的最少个数；色谱保留值——定性依据；色谱峰高或面积——定量依据；色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标；色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。 一、气相色谱分析原理 气相色谱过程：待测物样品被蒸发为气体并注入到色谱分离柱柱顶，以惰性气体（指不与待测物反应的气体，只起运载蒸汽样品的作用，也称载气）将待测物样品蒸汽带入柱内分离。其分离原理是基于待测物在气相和固定相之间的吸附-脱附（气固色谱）和分配（气液色谱）来实现的。因此可将气相色谱分为气固色谱和气液色谱 气固色谱：利用不同物质在固体吸附剂上的物理吸附-解吸能力不同实现物质的分离。由于活性（或极性）分子在这些吸附剂上的半永久性滞留 吸附-脱附过程为非线性的 ，导致色谱峰严重拖尾，因此气固色谱应用有限。只适于较低分子量和低沸点气体组分的分离分析。 分配系数 K 在平衡状态时，组分在固定液与流动相中的浓度之比（Partition confficient）。 如二组分K相同，则峰重合；差别越大峰相离的越远。 分配比（k） 亦称容量比，在一定温度和压力下，两相平衡时，组分在两相中的分配量，即组分在固定相和流动相中的重量比。 故 k 值可从实验分析的色谱图中求出。 分配比越大组分停留在固定相中的分子数越多，保留时间越长。 K 与 k 的关系： 选择因子 ：色谱柱对A、B两组分的选择因子 定义如下： A为先流出的组分，B为后流出的组分。 K 或 k 反映的是某一组分在两相间的分配；而 是反映两组分间的分离情况！当两组分 K 或 k 相同时， 1 时，两组分不能分开；当两组分 K 或 k 相差越大时， 越大，分离得越好。也就是说，两组分在两相间的分配系数不同，是色谱分离的先决条件。 塔板理论假定： 1）塔板之间不连续； 2）塔板之间无分子扩散； 3）组分在各塔板内两相间的分配瞬间达至平衡，达一次平衡所需柱长为理论塔板高度H； 4）某组分在所有塔板上的分配系数相同； 5）流动相以不连续方式加入，即以一个一个的塔板体积加入。 塔板理论指出： 第一，当溶质在柱中的平衡次数，即理论塔板数n 50时，可得到基本对称的峰形曲线。在色谱柱中，n值一般是很大的，因而这时的流出曲线可趋近于正态分布曲线； 第二，当样品进入色谱柱后，只要各组分在两相间的分配系数有微小差异，经过反复多次的分配平衡后，仍可获得良好的分离； 第三，n与半峰宽及峰底宽的关系为：见书上488 式中，tr与W1/2应采用同一单位（时间或长度单位）表示。由以上两式可知：在tr一定时，如果色谱峰越窄，则说明n越大，H越小，柱效能越高。 柱效（H有效） 在实际工作中，常用有效塔板数n有效数表示柱效。 即， 柱效是判断色谱柱好坏的一个尺度，但还不完全；判断色谱柱好坏的另一个尺度是分离效率（分离度）：相邻两峰的保留时间之差与其各自半峰宽之和的比值。即， 可见，两时间保留时间差越大，两峰相距越远；两峰越窄，R越大。相邻两组分分离就越好。一般认为R≥1.5时，两个组分就可以完全分离。 R和n有效的关系用数学式表示为：