动物细胞工程223313097教程方案.pptVIP

2.2动物细胞工程 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 知识回顾 1、植物组织培养的过程 2、植物体细胞杂交的过程 自主学习 1、阅读书中P44——P47关于动物细胞培养的部分，完成资料P23—P24自主梳理的相关内容。 2、注意书中新出现的关于动物细胞培养的专业名词。 成果展示 1、什么是动物细胞培养？ 2、为什么要分散成单个细胞和怎样分散成单个细胞？ 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 离体 分散 适宜 无分化 离体的成块组织中细胞与细胞靠在一起（细胞之间有联系如糖蛋白，胶原蛋白等），彼此限制了细胞的生长和增殖 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间 成果展示 3、为什么用胰蛋白酶不用胃蛋白酶，为什么处理一段时间，时间长了行吗？ 4、培养过程中细胞有哪些现象？ 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。时间长了会消化细胞膜上的的蛋白质，对细胞有损伤作用 细胞贴壁：细胞悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，我们称之为细胞贴壁 细胞的接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 成果展示 5、关于培养的专业名词？ 6、动物细胞培养的大致过程？ 原代培养：人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。（换培养液不叫传代培养） 传代培养：分瓶继续培养，让细胞继续增殖，称为传代培养。（代：表换瓶的次数，不表细胞分裂的次数） 动物细胞培养 1、概念： 2、相关概念 a、单个细胞的制取：b、细胞贴壁c、细胞的接触抑制d、原代培养e、传代培养 f、细胞株 g、细胞系 h、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。 i、单层培养法 3、过程 1、提示：充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境。2、提示：无菌、无毒的环境。 【讨论1】多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考并讨论以下问题：1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？ 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ 1.无菌、无毒的环境 2.一定的营养物质：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外还通常需加入 血清、血浆等天然成分。 3.适宜的温度和pH：温度为36.5℃±0.5℃，pH为7.2～7.4。 4. 气体环境：CO2和O2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 动物细胞培养的条件 动物细胞培养技术的应用 1、获得生物制品 2、为基因工程提供技术支持 3、毒性检测 4、医学理论研究 动物细胞培养与植物组织培养的区别 作业 1、原代培养传代培养 2、动物细胞培养的过程 知识回顾 1、动物细胞培养的大致过程？ 1、阅读书中P47——P50关于动物体细胞核移植技术和克隆动物的部分，完成资料P24自主梳理的相关内容。 2、注意书中新出现的关于动物体细胞核移植技术和克隆动物的专业名词。 自主学习 讨论 1、培养离体的动物细胞，能否得到动物个体？如果不能，那是为什么？如果能，怎样操作？（1组8组） 2、什么是动物核移植？什么是克隆动物？（2组） 3、既然细胞核有全能性，为什么不能只用一个核进行培养，还要和去核卵母细胞形成重组细胞才能体现全能性？（3组9组） 4、体细胞核移植的大致过程（4组） 成果展示 1、培养离体的动物细胞，能否得到动物个体？如果不能，那是为什么？如果能，怎样操作？（1组8组） 2、什么是动物核移植？什么是克隆动物？（2组） 不能，动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。 但是动物的细胞核具有全能性。 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。（克隆动物和核供体的动物，细胞核是一样的，因此它们长得一样） 成果展示 3、既然细胞核有全能性，为什么不能只用一个核进行培养，还要和去核卵母细胞形成重组细胞才能体现全能性？（3组9组） 因为细胞是一个统一的整体，是最基本的生命系统，只有细胞核是没法进行生命活动的，而供体细胞的细胞质可能有抑制细胞体现全能性的物质或结构，但卵母细胞的细胞质有促进细胞全能性表达的物质和营养条件，因此去核卵母细胞和供体核重组成重组细胞能很好的体现细胞全能性。 成果展示 4、体细胞核移植的大致过程（4组） 书中讨论题 1.在体细胞的细胞核移植到受体