第十章细胞核与染色体技术分析.pptVIP

第十章 细胞核与染色体 主要内容 核被膜与核孔复合体 染色质染色体 核仁 第一节 核被膜与核孔复合体 1 核被膜是双层膜结构 膜厚：7.5nm 外核膜：来源于内质网，附有核糖体； 核周隙：宽20-40nm，与ER腔相通； 内核膜：表面光滑，内表面有核纤层以及特异蛋白； 核纤层：内核膜内表面的纤维网络，支持核膜，并与染色质、核骨架相连； 核孔：核的内外膜在在一些位点融合形成的环状开口，直径80-120nm。 2 核孔复合体 组成：至少由100多种蛋白质组成； 数量：一般哺乳动物细胞约3000-4000个核孔； 大小：120-150nm； 结构模型 ：捕鱼笼式（fish-trap）； 3 捕鱼笼式核孔复合体组成 胞质环：位于核孔边缘的胞质面一侧，从环上向胞质伸出8条呈对称分布的短纤维，又称外环； 核质环：位于核孔边缘的核质面一侧，环上对称地连有8条细长的纤维，又称内环； 辐：由核孔边缘伸向中心，呈辐射状八重对称； 柱状亚单位 腔内亚单位 环带亚单位 中央栓：又称中心颗粒，位于核孔的中心，呈颗粒状或棒状。 4 核孔复合体的功能—核质间的物质转运 小分子的转运—被动扩散 大分子的转运—主动运输 小分子的转运—被动扩散 ? 核孔有效直径9-10nm左右，扩散速度与分子量成反比。小于5×103的可自由进入，大于60×103的不能进入。 大分子的转运—主动运输 ? 主动运输的选择性： (1)对颗粒大小的限制，一般可达10-20nm，核孔复合体的有效直径是可以调节的； (2)主动运输是信号识别和载体介导的过程，需要ATP； (3)具有双向性。 ? 核定位信号（NLS）： 引导蛋白进入细胞核，4-8个氨基酸组成； ? 协助蛋白质： 如 importin， Ran 。 主要内容 核被膜与核孔复合体 染色质与染色体 核仁 第二节 染色质与染色体 1 概念 ? 染色质：是指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构，是间期细胞遗传物质存在的形式。 ? 染色体：是细胞在有丝分裂时遗传物质存在的特殊形式，是间期细胞染色质结构紧密包装的结果。 2 染色质的化学组成 组成：DNA、组蛋白、非组蛋白、少量RNA。 比例：1:1:(1-1.5):0.1 染色质DNA 以DNA序列重复的频率分为三类： ? 单一序列 ? 中度重复序列 ? 高度重复序列 3 染色质蛋白质—组蛋白和非组蛋白 组蛋白 ? 概念：构成真核生物染色体的基本结构蛋白， 富含带正电荷的赖氨酸和精氨酸。 ? 五种： H1，H2A，H2B，H3，H4； ? 带正电荷，碱性蛋白； ? 非特异性地与DNA结合。 非组蛋白 ? 概念：染色体上与特异DNA序列相结合的蛋白质。 ? 带负电荷，酸性蛋白； ? 有种属和组织特异性； ? 整个细胞周期都合成，组蛋白只在S期合成； 4 染色质的基本结构单位—核小体 组成 一个组蛋白八聚体:4个二聚体，H2A，H2B，H3，H4 一个H1 1.75圈DNA超螺旋链，约146个bp 　　 5 染色质包装的结构模式 染色质包装的多级螺旋模型 ? 一级结构：核小体 ? 二级结构：螺线管 ? 三级结构：超螺线管 ? 四级结构：染色单体 ? 一级结构：核小体 组成： DNA 1.75圈 约146个bp 　　　 组蛋白八聚体　　一个 ? 二级结构：螺线管 以直径30nm染色质纤维的形式存在 在Ｈ1参与下形成 每周含６个核小体 核小体压缩6倍 核小体和螺线管的结构 ? 三级结构：超螺线管 直径400nm 圆筒状结构 压缩40倍 ? 四级结构：染色单体 超螺线管再一次折叠 螺旋化 2-10um 压缩5倍 1号染色体中的DNA包装倍数 6 常染色质和异染色质 常染色质：间期核内染色质纤维折叠压缩程度低，处于伸展状态，用碱性染料着色浅的染色质。 异染色质：间期核中，染色质纤维折叠压缩程度高，处于聚缩状态，用碱性染料染色时着色深的染色质。 ? 结构异染色质 ? 兼性异染色质 ? 结构异染色质 整个细胞周期中处于凝集状态的染色质。多位于着丝粒、端粒和染色体臂的凹陷部位，合成于S期。 ? 兼性异染色质 在一定细胞类型、一定发育阶段，原来的常染色质聚缩，凝集成异染色质状态。 —— X染色体失活 深染区：异染色质，浅染区：常染色质 常染色质与异染色质比较 7 染色体的