第四章植物的快速繁殖技术分析.ppt

第四章、 植物离体快速繁殖和 脱病毒技术 一、植物的繁殖 有性繁殖：开花、传粉、受精、种子 繁殖方式 扦插、嫁接、埋条、压条等 人工营养繁殖 无性繁殖 快速繁殖：利用组织培养技术 二、植物的快速繁殖 （一）、概述 利用组织培养技术，将优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织进行离体培养，在短时间内获得大量遗传性状一致的植株的技术称为植物快速繁殖技术。 例如：一个大花惠兰的原球茎，在一个月可以增殖6个，一年继代8次，可长出200万左右个原球茎，诱导即可成为商品试管苗。 （二）、植物快速繁殖的应用 1、杂合植物材料的大量繁殖 2、脱病毒种苗的生产 3、加速繁殖数量有限的特殊种质材料 4、单独繁殖雄株或雌株 （三）、快速繁殖的类型 1.腋生枝型 指在离体条件下利用外植体上已有的顶芽和腋芽诱导其发育成枝，并培养成苗的繁殖方式。 这种‘芽生芽’的增殖过程获得的再生植株遗传性状最稳定。 2.不定芽型 利用外植体上得不定芽直接分化培养成苗的繁殖方式。 利用愈伤组织间接分化产生不定芽，再生成苗的方式。后代遗传变异较大。 3.体细胞胚型 目前只限于柑橘、油棕、咖啡等易于诱导产生胚状体的植株的诱导。 4.原球茎型 兰科植物特有的一种繁殖方式。其种子在萌发初期不出现胚根，只是胚的膨大，破裂成小圆锥形，称作原球茎。兰科的茎尖、侧芽、花茎、叶、根等体外诱导均可产生类原球茎，再诱导发育成苗。 （四）、植株快速繁殖的操作流程 1、无菌母株的制备 茎尖、根尖或带芽的植物材料无菌制备； 各种器官或组织脱分化，分裂产生的愈伤组织 2、不定芽的诱导 侧芽途径：诱导出不定芽丛 器官发生途径：诱导不定芽 胚状体途径：诱导不定芽丛 不定芽反复切割培养，快速繁殖出大量的丛芽 3、完整植株的形成 生根培养基上诱导生根，形成完整植株。 （再生植株的驯化） 4、试管苗的移栽 试管苗的特点： 叶片面积小，叶表保护组织不发达或无，气孔功能差，叶片持水能力低，维管组织不完善，根毛少，易倒伏等。 再生苗的驯化 目的：使试管苗适应外界环境，提高再生苗的成活率 驯化方式： 首先：提前一周打开瓶口，进行湿度锻炼，日光锻炼，通过晒苗恢复光合功能，使苗由异养到自养。 其次：取出苗，洗净根，移栽入含有蛭石、水草等的花盆中。保持较高湿度（80～90％），较弱光照的条件下培养 2~4周。 再次：小植株长出新根和新叶后，再加强通风和光照，直至过渡到温室或自然生长环境。 5、再生苗的鉴定 商品性状：苗龄、株高，叶片颜色，茎粗，根毛数等 健康状况：是否携带病毒，流行病菌等 农艺性状：生育期的长短，抗性，开花结实性等 遗传稳定性：染色体数目，分裂期染色体行为等 （五）、我国在植物快速繁殖产业取得的主要进展 1、香蕉 试管苗生产数量最多的，年生产能力达到2000万株。 2、马铃薯 产出试管苗和微型署。 3、甘蔗、草莓、苹果、柑橘、葡萄、造林树种、经济林木 4、花卉 兰花、非洲菊、非洲紫罗兰、百合等和各种观叶植物的种苗 兰花 例：蝴蝶兰的组织培养和快速繁殖 取材：幼嫩花梗为起始材料 消毒：将花梗上张开的苞片去除。将梗切成5cm长的小段，0.5％的次氯酸钠消毒15min，无菌水冲洗3次。 接种：消毒后的梗转移到无菌平皿中，切成0.5～0.3cm的切段，接入MS培养基中 培养：25℃ ，2000LX光强，4周后膨大，6周后长出原球茎 继代培养：原球茎切割培养于MS培养基中（加入激素、香蕉、活性碳），诱导发育成小植株。 再生根 驯化 移栽 蝴蝶兰花梗培养 花梗诱导出芽 （六）离体繁殖中易出现的问题 1.污染 2.褐变 在组培过程中由于材料的切割而使得多酚氧化物活化，将组织中的酚类物质氧化成棕黑色的醌类物质。并向培养基中扩散，抑制培养物的生长，甚至导致其死亡的现象。 采取的措施: 1.向培养基中加入抗氧化剂和吸附剂 例如：柠檬酸、Vc、半胱氨酸、硫代硫酸钠及活性炭 2.用抗氧化剂溶液预处理外植体，或是外植体在抗氧化溶液中切割。 3.将褐变的外植体及时转移到新鲜培养基上 4.将培养基置于相对较低温度或弱光或黑暗条件下培养。 3.玻璃化现象 也称‘超水化作用’，指离体培养过程中试管苗发生形态、生理和代谢异常的现象。 发生玻璃化的苗由于细胞过度吸水而肿胀、扭曲、枝条和叶脉呈水浸状，半透明状，脆弱易碎。 多发生在以芽、枝、苗为外植体长期体外培养