维生素D类似物EB1089对胰腺癌细胞生长抑制作用及其机制研究.pdfVIP

目录 一、摘要 中文论著摘要?????????????????????????0l 英文论著摘要?????????????????????????03 二、英文缩略语??????????????????????????05 三、论文 论文一??????????????????????????????06 前言?????????????????????????????06 材料和方法??????????????????????????06 结果(附论文图片)??????????????????????10 讨论?????????????????????????????14 结论?????????????????????????????15 参考文献???????????????????????????16 论文二??????????????????????????????18 前言?????????????????????????????18 材料和方法??????????????????????????19 结果(附论文图片)??????????????????????21 讨{仑?????????????????????????????25 结{仓?????????????????????????????27 参考文献???????????????????????????28 四、本研究创新性的自我评价????????????????????30 五、附录 综述(含参考文献)??????????????????????31 在学期间的科研成绩??????????????????????41 致谢?????????????????????????????42 个人简介???????????????????????????43 万方数据 ·中文论文摘要· 维生素D类似物EBl089对胰腺癌细胞生长抑制作用 及其机制的研究 目的 胰腺癌恶性程度高，90％的胰腺癌患者在诊断后一年内死亡，适合手术治疗 者低于10％，术后5年生存率低于5％。预后差归因于缺乏有效的治疗手段。故研 究新的治疗靶点至关重要。本研究旨在探讨维生素D受体表达对胰腺癌患者预后 的影响及维生素D类似物EBl089是否通过抑制胰腺癌细胞增殖，促进胰腺癌细 胞凋亡来抑制其生长，为胰腺癌的治疗提供新的治疗选择。 方法 收集2006年1月至2012年12月我院具有完整临床资料的胰腺导管腺癌手术切 除标本61例，均有癌旁组织作为对照。另有12例胰腺癌及配对的癌旁组织新鲜标 本。(1)免疫组织化学(IHC)检澳rJ61例配对的胰腺癌和癌旁组织中VDR蛋白表达 水平，探讨其表达的临床病理学意义及与患者预后的关系。(2)细胞培养：AsPC．1、 BxPC-3、Capan-2、CFPAC一1、PANC一1及MIApaca-2细胞按常规培养。(3)Western blot 检测VDR蛋白在胰腺癌细胞和组织中表达水平。(4)MTT法检钡JJEBl089对胰腺癌细 胞(Capan-2、PANC-1、MIApaca-2)的生长抑制作用。(5)流式细胞仪检测EBl089 对胰腺癌细胞(Capan-2)细胞周期及凋亡的影响。(6)Western blot检测EBl089对 细胞生存及凋亡信号通路相关靶蛋白表达的影响。 结果 (1)IHC结果显示：VDR在24例配对的高分化胰腺癌组织中的表达率为62．5％ (15／24)，远远高于在37例中低分化胰腺癌组织中的表达率24．3％(9／37)。VDR 主要呈胞浆和核膜的表达，其表达高低与胰腺癌患者年龄(P=O．033)、肿瘤大小 (P=O．006)呈负相关，与肿瘤分化程度(P=0．004)呈正相关，但与患者性别、 肿瘤部位、淋巴结转移、神经侵润、UICC分期、术前CAl99水平、术后肝转移 无相关性。单因素分析发现，VDR高表达胰腺癌患者预后良(P_O．037)，肿瘤 万方数据 UICC分期(P=0．001)、淋巴结转移(P=O．022)、血管侵润(P=0．015)及术后肝 转移(P=0．001)同样是影响胰腺癌预后因素。多因素分析发现，UICC分期 (P=0．045)与胰腺癌术后肝转移(P=0．006)是影响胰腺癌患者预后独立危险因 素。(2)Western blot结果显示：VDR蛋白在8例中低分化胰腺癌组织中表达明显 低于配对的癌旁正常组织，而在4例高分化胰腺癌及癌旁正常组织表达无明显差 异。VDR蛋白在AsPC．1、PANC．1和BxPC．3、Capan．2、CFPAC．1中表达较高， 而在MIApaca-2中较低，故我们选择Capan-2、PANC．1和MIApaca-2细胞进行下 一步实验。(3)MTT检测显示：随着EBl089浓度和用药时