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一.底物浓度的影响
(一)可逆抑制作用 1. 竞争性抑制作用 六. 抑制剂对酶反应速度的影响 例如,丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。 这种抑制作用可通过增加底物浓度而使整个反应平衡向生成产物的方向移动,因而能削弱或解除这种抑制作用。? (一)可逆抑制作用 1. 竞争性抑制作用 六. 抑制剂对酶反应速度的影响 (一)可逆抑制作用 1. 竞争性抑制作用 六. 抑制剂对酶反应速度的影响 琥珀酸 延胡索酸 丙二酸 * * 第四节 影响酶反应速度的因素 一.底物浓度的影响 (一) 酶反应速度与底物浓度的关系曲线 对于简单的酶反应,当酶浓度和其他条件恒定时: v [S] 0 Vmax 零级反应 一级反应 混合级反应 该曲线可以用米氏方程 来描述 一.底物浓度的影响 (一) 酶反应速度与底物浓度的关系曲线 一.底物浓度的影响 dp/dt?k[E][S]:一级反应 dp/dt?k[E]:零级反应 (一) 酶反应速度与底物浓度的关系曲线 (二) 米氏方程 为了要解释这一现象,Michaelis Menten 提出了中间络合物学说。 1. 米氏方程的推导 该学说必须两个条件: (1)符合质量作用定律 (2)形成的中间产物决定整个反应的速度 一.底物浓度的影响 (二) 米氏方程 Michaelis Menten 提出了中间络合物学说。 1. 米氏方程的推导 一.底物浓度的影响 (二) 米氏方程 对于单底物、单产物反应,其反应过程需经过中间复合物ES,即 1. 米氏方程的推导 E+S K1 K3 ES K2 K4 E+P Michaelis-Menten的三个假设: (1)推导的v为反应初速度 一.底物浓度的影响 (二) 米氏方程 1. 米氏方程的推导 Michaelis-Menten的三个假设: (1)推导的v为反应初速度 一.底物浓度的影响 产物的生成量很少 → k4 的反应忽略不计。即 (二) 米氏方程 1. 米氏方程的推导 Michaelis-Menten的三个假设: (1)推导的v为反应初速度 一.底物浓度的影响 [E]?酶总量;[Et]?反应后t时的酶量; [ES]?中间产物浓度 [Et] ? [E]-[ES] (二) 米氏方程 1. 米氏方程的推导 Michaelis-Menten的三个假设: (1)推导的v为反应初速度 一.底物浓度的影响 刚反应时,若形成的速度为v,则 v1?k1 [Et][S] ? k1[(E)-(ES)][S] (1) ES消失速度: v2 ?k2[ES]; v3 ?k3[ES] v23 ? k2 [ES]? k3[ES] ?(k2? k3)[ES] (2) (二) 米氏方程 1. 米氏方程的推导 Michaelis-Menten的三个假设: (2)反应体系处于稳态 一.底物浓度的影响 (二) 米氏方程 1. 米氏方程的推导 Michaelis-Menten的三个假设: (2)反应体系处于稳态 即[ES]不变 → ES的生成量 = ES的分解量。即 v1 =v23 k1[(E)-(ES)][S] = [ES] (k2? k3) [(E)-(ES)][S]/ [ES] = (k2? k3)/ k1 (3) 设 Km=(k2+k3)/k1 将(3)重排得 [ES] =[E][S]/ Km ? [S] (4) 一.底物浓度的影响 (二) 米氏方程 1. 米氏方程的推导 Michaelis-Menten的三个假设: [E] =[ES],V = K1[E],即K1 = V/ [E] (5) 同时,v = K1[ES], K1 = v/ [ES] (6) (5) + (6) [ES] =v [E] /V (7) (7)代入(4)得 v [E] /V = [E][S]/ Km ? [S] (3)[S] [E] 一.底物浓度的影响 (二) 米氏方程 V = Vmax·[ S ] Km + [ S ] 1. 米氏方程的推导 一.底物浓度的影响 (二) 米氏方程 2. 米氏方程中常数的意义 Km—— 米氏常数 由于 Km= (k2+k3)/k1 , ∴ 为复合常数。 Km是酶的特征常数,经常表示酶与底物的亲和力。 Km值越大,亲和力越小。 一.底物浓度的影响 (二) 米氏方程 2. 米氏方程中常数的意义 Km的值是当反应速度为最大反应速度的一半时所对应的底物浓度。 所以Km的单位为浓度单位 一.底物浓度的影响 Km = [S]
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