蟾蜍心脏的影响(4学时).docVIP

青岛大学医学院实验教案 实验项目 某些因素对离体蟾蜍心脏的影响 授课对象 临床医学 授课时数 2学时 2009.10 授课地点 机能学实验室 授课人 职 称 学习离心蛙心灌流的方法和观察内环境变化对离体蛙心功能的影响。 离心蛙心灌流的方法心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境里才能维持，一旦适宜的理化环境被干扰或破坏，心脏活动就会受到影响。 教学方法 理论讲授试验原理步骤和方法。 2. 将学生分为小组，分别进行试验。 教学仪器 常用手术器械、计算机采集系统、任氏液、棉线、试管夹、蛙心插管、滴管、烧杯离体蛙心灌流装置。 准备好离体蛙心灌流装置，并与记录仪器相联接。取一蟾蜍，破坏脑脊髓、暴露心脏。在右主动脉下穿一根线并结扎，再在左右主动脉下穿一根线。将心脏用玻璃分针向上翻至背面，将前后腔静脉和左右肺静脉一起结扎（注意勿扎住静脉窦）。将心脏回复至原位，在左主动脉下穿两根线，用一根线结扎左主动脉远心端，另一线置主动脉备用。提起左主动脉远心端线，用眼科剪刀在左主动脉上靠近动脉园椎处剪一斜口，将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉，插至动脉园锥时略向后退，在心室收缩时，向心室后壁方向下插，经主动脉瓣插入心室腔（不可插入过深，以免心室壁堵住插管下口）。插管若成功进入心室、管内液面会随着心室跳动而上下波动。用左主动脉上近心端的备用线结扎插管，并将结扎线固定于插管侧面的小突起上。提起插管，在结扎线远端分别剪断左主动脉和右主动脉。轻轻提起插管，剪断左右肺静脉和前后腔静脉，将心脏离体，用滴管吸净插管内余血，加入新鲜任氏液。反复换洗数次，直至液体完全澄清。保持灌流液面高度恒定（1~2cm），即可进行实验。离子的影响 吸出插管内全部灌流液，换入0.65%NaCl观察心缩曲线变化，待效应明显后，吸出灌流液，用新鲜任氏液换洗3次，直至心缩曲线恢复正常。 加入1~2滴2%CaCl2于新换入的任氏液中，观察心缩曲线的变化。待出现效应后，用新鲜任氏液换洗3次至曲线恢复正常。 加1~2滴1%KCl于新换入的任氏液中，待出现效应后，再用任氏液换洗至曲线恢复正常。 递质的作用 加入1~2滴1:10000在去甲肾上腺素于灌流液中，待效应出现后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。 加入1滴1:10000乙酰胆碱于灌流液中，待效应出现后，用任氏液换洗至曲线恢复正常。 温度的影响 将插管内的任氏液吸出，换入4的任氏液，观察曲线变化，待效应明显后，吸出灌流液，换入室温的任氏液，直至曲线恢复正常。 酸碱的影响 加入2.5%NaHCO3溶液1~2滴干灌流液中，观察曲线变化，待效应明显后，换用任氏液换洗，直至曲线恢复正常。 加3%乳酸1~2滴于灌流液中，观察曲线变化。待效应明显后，再加1~2滴2.5%NaHCO3，观察曲线变化。 思考题 离体心脏的活动受那些因素影响，其作用机制如何，在体心脏的活动主要受那些因素调节？ 《医学机能实验学》 《生理学》