同源克隆结合RACE技术扩增基因全长分解.pptVIP

同源克隆结合RACE技术扩增基因全长 同源克隆 这是一种参考其他物种的已知基因序列克隆待研究物种目标基因的方法。目前很多植物基因的序列信息已经公布，当克隆类似基因时可先从基因文库中找到相关基因序列，经比对后设计简并引物，然后通过的PCR方法进行克隆。 同源克隆 如果计划克隆的基因在本物种中已经有报道,那么只需要在NCBI网站上的Nucleotide数据库中检索到该基因序列,随后设计基因特异引物进行PCR扩增即可. 如果计划克隆的目的基因在本物种中未见报道,则可以以近源物种中报道的该基因序列检索数据库,看是否能够比对到本物种的公布序列,从而设计基因特异引物进行PCR扩增.如果无法比对到本物种的表达序列,那么只有比对近源物种中所报道的该基因序列从而设计基因简并引物进行PCR扩增. 同源克隆 根据实验要求和目的不同,有时只需要得到基因片段,有时则需要得到基因全长. 同源克隆 如果需要得到基因全长,在克隆本物种中未见报道的基因时还需结合染色体步移,全长cDNA文库筛选或是RACE（Rapid-amplification of cDNA ends）技术等方法. RACE(Rapid-Amplification of cDNA Ends)技术 基因同源克隆实例 二球悬铃木PaFT基因的克隆 从营养生长转向生殖生长是植物一生中最重要的变化。 70年前，经