基因表达技术课件.pptxVIP

2017-4-1 1 医学分子遗传学 第四章分子遗传技术方法 基因表达分析技术 METHODS FOR ANALYZING GENE EXPRESSION Speaker： gene mRNA Protein polypeptide chain Gene Expression 2017-4-1 2 一、实时荧光定量PCR （real time quantitative PCR，RT-qPCR） 2017-4-1 3 实时荧光定量PCR (real time quantitative PCR，RT-qPCR)是荧光化学物质与PCR产物相结合，在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实现了实时监测整个PCR进程，对起始模板进行定量分析的方法。 荧光定量实时PCR与普通PCR的比较 ?在线实时监控 对样品扩增的整个过程进行实时监控，能够实时地观察到产物的增加，直观地看到反应的对数期 ? 降低反应的非特异性 使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合，提高了PCR反应的特异性 ? 增加定量的精确性 全程监控，精确定量 ? 结果分析更快捷方便，无需电泳 2017-4-1 6 荧光染料 SYBR Green I 是一种结合于双链DNA（double-strand,dsDNA） 小沟