人工基因组的设计与合成-复习课详解.pptx

人工基因组的设计与合成 李炳志 2014-04-20 1 核酸与基因 2 基因表达与调控 3 现代生物技术 4 人工合成酵母染色体 复习大纲 DNA是遗传物质，而蛋白质不是遗传物质。 核酸的化学组成 核酸的基本组成单位 ——核苷酸 DNA结构特点 1 核酸与基因 Watson 和 Crick 于1953年提出了DNA 双螺旋结构模型，说明了DNA 的二级结构。（即B型DNA） DNA二级结构 DNA双螺旋结构模型要点（1） 螺旋中的两条链反向平行，即其中一条链的方向为5’→3’,而另一条链的方向为3’→5’,两条链共同围绕一个假想的中心轴呈右手双螺旋结构。 疏水的碱基位于双螺旋的内侧，亲水的磷酸和脱氧核糖基位于螺旋外侧。碱基平面与螺旋轴垂直，脱氧核糖平面和碱基与中心轴平行。由于几何形状的限制，碱基对只能由嘌呤和嘧啶配对，即A与T，G与C。这种配对关系，称为碱基互补。 DNA双螺旋结构模型要点（2） 磷酸和脱氧核糖是双螺旋的骨架 A和T之间形成两个氢键，G与C之间形成三个氢键。 碱基配对决定了核酸的特异性 DNA双螺旋结构模型要点（3） 由于碱基对排列的方向性，使得碱基对占据的空间是不对称的，因此，在双螺旋的表面形成大小两个凹槽，分别称为大沟和小沟，二者交替出现。 DNA双螺旋结构模型要点（4） 双螺旋横截面的直径约为2nm，相邻两个碱基平面之间的距离（轴距）为0.34nm，每10个核苷酸形成一个螺旋，其螺距（即螺旋旋转一圈）的高度为3.4 nm。 DNA双螺旋结构模型要点（5） 两条链借碱基之间的氢键和碱基堆积力（即碱基之间的范德华力）牢固的连接起来，维持DNA双螺旋的三维结构。 两条链是互补关系。 中心法则 复制 1 核酸与基因 特点一：DNA的半保留复制 以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。 DNA复制的特点 半保留复制 DNA半保留复制图示： 特点二：DNA的复制是半不连续的 DNA 复制在合成前导链（leading strand) 时是连续的；而在合成滞后链(lagging strand)时是先形成冈崎片段（ Okazaki fragment ），随后再将它们连接而成大片段。因滞后链是不连续合成的而先导链是连续合成的，所以我们称之为半不连续复制（semidiscontinuous replication)。 先导链 滞后链 冈崎片段 转录 (transcription) 以DNA的一条链为模板合成一条互补的RNA的过程 。 转录 转录的特点 不对称转录(asymmetric transcription)： 在DNA分子双链上某一区段，一股链用作模板指引转录，另一股链不转录 。 转录单元：一段被转录成单链RNA的 DNA序列，它起始于启动子，结束于终止子。 转录过程只以基因组DNA中编码RNA（mRNA、tRNA、rRNA及小RNA）的区段为模板。把DNA分子中能转录出RNA的区段，称为结构基因。 编码链(coding strand)：与模板链相对应的互补链，其编码区的碱基序列与mRNA的密码序列相同（仅T、U互换），也称作Crick（C）链（Crick strand）、正（+）链(plus strand)，或有意义链(sense strand)。 模板链(template strand)：DNA双链中仅有一股链作为模板转录成RNA，也称作Watson（W）链(Watson strand)、负（-）链(minus strand)或反意义链(antisense strand)。 转录的四个阶段 转录可以分为4个阶段：模板识别、起始、延伸和终止。 蛋白质生物合成的概念 蛋白质生物合成(protein biosynthesis)也称翻译(translation)，是生物细胞以mRNA为模板，按照mRNA分子中核苷酸的排列顺序所组成的密码信息合成蛋白质的过程。 定义 翻译——肽链的生物合成过程 从mRNA的起始密码子AUG开始，按5ˊ→3ˊ方向逐一读码，直至终止密码子。于是，合成中的肽链从起始甲硫氨酸开始，从N端→C端延长，直至终止密码子前一位密码子所编码的氨基酸。 遗传密码的特点 1. 方向性(directional) 翻译时遗传密码的阅读方向是5’→3’，即读码从mRNA的起始密码子AUG开始，按5’→3’的方向逐一阅读，直至终止密码子。 2. 连续性(non-punctuated) 编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读，密码子及密码子的各碱基之间既无间隔也无交叉。 3. 简并性(degene