一轮基础精讲-34-微生物的利用.docxVIP

微生物的利用 适用学科 高中生物 适用年级 高中三年级 适用区域 全国 课时时长（分钟） 90 知识点 （1）培养基及其配置 （2）无菌技术 （3）微生物培养的基本技术 （4）菌种保藏 （5）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 （6）分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选 学习目标 了解并熟练掌握以下考点： （1）培养基及其配置 （2）无菌技术 （3）微生物培养的基本技术 （4）菌种保藏 （5）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 （6）分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选 学习重点 （1）培养基及其配置 （2）无菌技术 （3）微生物培养的基本技术 （4）菌种保藏 学习难点 （1）土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 （2）分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选  学习过程 一、复习预习 一、培养基及其配制 1．培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2．培养基的成分：一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。还需要满足生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 二、无菌技术 三、微生物培养的基本技术 四、菌种保藏 \o(\s\up12(临时保藏)　后，放入4℃冰箱中保藏，以后每　3～6个月，转移到新的培养基缺点：保存时间不长，菌种易被　污染或产生变异)长期保存法：甘油管藏法，放在－20℃下保存 五、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 菌种筛选\b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(培养基：选择培养基特点：尿素是唯一氮源)\s\up12(统计菌落数目)显微镜直接计数)CV)×M)\s\up12(设置对照)　条件都相同的实验主要目的：排除实验组中非测试因素对　实验结果的影响)) 六、分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选 ?1?土壤取样：选择富含纤维素的环境?2?将样品涂布到鉴别纤维分解菌的培养基上A.制备鉴别培养基：主要碳源是CMC—NaB.刚果红染色法a.先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应b.倒平板时加入刚果红?3?进一步鉴定a.为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需进　行发酵产纤维素酶的实验b.测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维　素后的产生的葡萄糖进行定量测定 温馨提示 自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同：①自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。②含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源物质，提供能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。 二、知识讲解 考点/易错点1 微生物的培养与应用 1.培养基的分类及应用 2.培养基配方及营养要素 基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 特别提醒 (1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。 (2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。 (3)有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。 (4)制备：计算→称量→熔化→灭菌→倒平板。 3．微生物培养的无菌技术 ①进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵，重点是消毒和灭菌。 使用方法 结　果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 ②三种常用灭菌方法的比较 灭菌方法 适用材料或用具 灭菌条件 灭菌时间 灼烧灭菌 接种环、接种针或其他金属工具 酒精灯火焰的充分燃烧层 直至烧红 干热灭菌 玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等 干热灭菌箱内，160～170℃ 1～2 h 高压蒸汽灭菌 培养基等 高压蒸气灭菌锅内100kPa，121℃ 15～30 min  考点/易错点2 微生物的纯化培养技术 1.原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。 2．微生物接种方法 (1)平板划线法：平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。(如图所示) (2)稀释涂布平板法：10倍系列稀释操作。 ①将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌，并按101～106的顺序编号。 ②进行梯度稀释后，从菌落开始，每次取前面1