第9章紫外—可见分光光度法.pptVIP

仪器分析的基本类型 三、仪器分析应用领域 application fields of instrument analysis 仪器的小型化渗透到各种类型的光谱仪器。 发射光谱仪器的台式或便携式直读光谱仪不断提高测定精度和定量的准确性发展，便携式XRF光谱仪更在进入各应用领域，原子吸收光谱仪器也出现了手提箱式的不用外接电源和气源的小型仪器。 同样情况也在分子光谱仪器的展示上得到充分的表现。展示了光谱仪器向小型化发展的大趋势。 便携式光谱仪器的技术进展 便携式仪器要求具有更高的分辨率、高信噪比、更好的强度准确性和波长准确性，更小的外界干扰影响，更优良的仪器稳定性，在仪器的软件上，要求能够进行导数、去卷积等计算，能够计算光谱间相似度，能够进行模式识别分析，能够进行多元校正分析，支持用户自建谱库并进行检索。在下列仪器： 便携近红外光谱仪 便携式中红外光谱仪 便携式拉曼分析仪 便携式 X 荧光光谱仪 均有体现。 便携近红外光谱仪 电磁波谱 光学光谱区 电磁波谱 光的互补性与物质的颜色 分子的光吸收机理 E=h?v=h(C/?) 　分子的吸收光谱是与其相应的电子能级特征相关的。同时也与振动和转动能级有关。 吸收曲线的讨论： 显色反应及显色剂： 这种被测元素在某种试剂的作用下，转变成有色化合物的反应叫显色反应（color reaction），所加入试剂称为显色剂(color reagent)。 常见的显色反应大多数是生成配合物的反应，少数是氧化还原反应和增加吸光能力的生化反应。 显示器(display) 显示器是将检测器检测的信号显示和记录下来的装置。在分光光度计中常用的是微安表、数码显示管等。简单的分光光度计多用微安表。在标尺上有透光度（T）和吸光度（A）两种刻度，由于吸光度和透光度是负对数关系，因此透光度的刻度是均匀的，而吸光度的刻度是不均匀的。 双光束型 光电二极管阵列型（DAD) 标准曲线法 其方法是先配制一系列浓度不同的标准溶液，用选定的显色剂进行显色，在一定波长下分别测定它们的吸光度A。以A为纵坐标，浓度c为横坐标，绘制A-c曲线，若符合朗伯—比尔定律，则得到一条通过原点的直线，称为标准曲线。然后用完全相同的方法和步骤测定被测溶液的吸光度，便可从标准曲线上找出对应的被测溶液浓度或含量，这就是标准曲线法。 在仪器、方法和条件都固定的情况下，标准曲线可以多次使用而不必重新制作，因而标准曲线法适用于大量的经常性的工作。 双波长分光光度法 有机化合物构型构象的判断 有机化合物构型确定图例 紫外标准光谱图及有关手册 “Sadtler Standard Spectra(Ultraviolet)” Heyden,London,1978. “Ultraviolet Spectra of Aromatic Compounds” Wiley,New York,1951. “Handbook of Ultraviolet and Visible Absorption Spectra of Organic Compounds” New York, Plenum,1967 “Oranic Electronic Spectral Data” 分光光度计的主要类型 单光束型 9.1.5 分光光度测定的方法 Blank Standard Sample Sample 标准对照法(直接比较法) 将试样溶液和一个标准溶液在相同条件进行显色、定容，分别测出它们的吸光度，按下式计算被测溶液的浓度。 k标=k测 b标=b测 所以 要求A与c线性关系良好，被测样品溶液与标准溶液浓度接近，以减少测定误差。用一份标准溶液即可计算出被测溶液的含量或浓度，方便，操作简单。 3．吸光系数法 在没有标准品可供比较测定的条件下，按文献规定条件测定被测物的吸光度，从样品的配制浓度、测定的吸光度及文献查出的吸光系数即可计算样品的含量，因为 则样品含量 例9-3 已知维生素B12在361nm条件下a标=20.7L·g－1·cm－1。精确称取样品3