实验10病毒血凝和血凝抑制试验要点.pptVIP

实验九质粒电泳病毒的血凝和血凝抑制 原理 与蛋白质分子类似，核酸 也是两性解离分子。在pH3.5时，碱基上的氨基基团解离，而三个磷酸基团中只有一个磷酸解离，整个核酸分子带正电荷，在电场中向负极泳动；在pH值为8.0~8.3时，碱基几乎不解离，磷酸全部解离，核酸分子带负电荷，向正极移动。 用适应浓度的凝胶介质作为电泳支持物，发挥分子筛的功能，使得分子大小和构象不同的核酸分子泳动率出现较大差异，达到分离的目的。 载样缓冲液 其中含有的甘油可以使待电泳样品沉在点样孔底部，避免样品漂浮 其中含有的溴酚蓝（某些还含有二甲苯青）可以作为电泳速度度的指示分子，溴酚蓝的迁移位置大约相当于200 bp左右的线性DNA分子的迁移位置。 溴化乙锭 溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合无特异性。当染料分子插入后，导致与DNA结合的染料呈现荧光，DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处发射出来。 溴化乙锭可以用来检测单链或双链核酸（DNA或RNA）。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小，所以其荧光产率也相对较低。 有一些低毒产品替代：sybr green、sybr gold、gene finder 电泳准备 用透明胶封固玻璃板两头，在板一