实验八改良半叶法测定叶片光合速--发出.docVIP

实验八 改良半叶法测定叶片光合速率 【原理】 植物进行光合作用形成有机物，而有机物的积累可使叶片单位面积的干物重增加，但是，叶片在光下积累光合产物的同时，还会通过输导组织将同化物运出，从而使测得的干重积累值偏低。为了消除这一偏差，必须将待测叶片的一半遮黑，测量相同时间内叶片被遮黑的一侧单位面积干重的减少值，作为同化物输出量 和呼吸消耗量 的估测值。这就是经典的半叶法测定光合速率的基本原理。测定时须选择对称性良好、厚薄均匀一致的两组叶片，一组叶片用于测量干重的初始值，另一组 半叶遮黑的 叶片用于测定干重的终了值，不但手续烦琐，而且误差较大。“改良半叶法”采用烫伤、环割或化学试剂处理等方法来损伤叶柄韧皮部活细胞，以防止光合产物从叶中输出 这些处理几乎不影响木质部中水和无机盐分向叶片的输送 ，仅用一组叶片，且无须将一半叶片遮黑，既简化了手续，又提高了测定的准确性。 【仪器与用具】 天平；烘箱1台；铝盒2个 或者 ；刀片；1把剪刀；有机玻璃模板1块；纱布块；纸牌0个；10小条等。 【】 选择叶片实验可在晴天上午7～8点钟开始。预先在选定有代表性的叶片 如叶片在植株上的部位、年龄、受光条件等应尽量一致 10张，挂牌编号。 叶片基部处理可用刀片将叶柄的外皮环割左右宽，切断韧皮部运输。为了使经以上处理的叶片不致下垂，可用锡纸、橡皮管或塑料管包绕，使叶片保持原来的着生角度。 剪取样品叶基部处理完毕后，即可剪取样品，记录时间，开始进行光合速率测定。一般按编号顺序分别剪下对称叶片的一半 中脉不剪下 ，并按编号顺序将叶片夹于湿润的纱布上，保持黑暗，带回室内。带有中脉的另一半叶片则留在植株上进行光合作用。过4～5后 光照好、叶片大的样品，可缩短处理时间 ，再依次剪下另一半叶。同样按编号包入湿润纱布中带回。两次剪叶的次序与所花时间应尽量保持一致，使各叶片经历相同的光照时数。 称重比较将各同号叶片之两半对应部位叠在一起，用适当大小的模板和单面刀片 或打孔器 ，在半叶的中部切 打 下同样大小的叶面积，将光暗处理的叶块分别放在下杀青10in，然后在下烘至恒重 约5 ，在分析天平上分别称重，将测定的数据填入表1中，并计算结果。 表用改良半叶法测定光合速率的记载表 测定日期： 月 日 地点： 第一次取样时间第二次取样时间取样面积（cm2）光合作用时间（h）暗处理叶的干重（mg）光照叶的干重（mg）干重增量（光—暗）（mg）计算 光合速率 g/dm2·h ＝[ 光暗 干重增量 g ]÷[叶片切块面积 d2 ×光合时间 ] 上述是总光合速率的测定与计算，如果需要测定净光合速率，只需将前半叶取回后，立即切块，烘干即可，其他步骤和计算方法同上。 【注意事项】 韧皮部，部分有机物仍可外运，测定结果偏低。 韧皮两半对应部位叠在一起，用适当大小的模板【思考题】 1. 2. 改良半叶测定光合速率受哪些因素的影响？ 3. 简要介绍测定光合速率的三种方法及原理。 4. 测定光合速率为什么要选择对称性好、叶龄、叶色、受光一致，无病虫害的功能叶？ 5. 为什么将待测叶片编号？ 6. 在改良半叶法中为什么要切割韧皮部？ 2