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第十一章 核酸的生物合成 核酸是遗传物质 亲代DNA……子代……子代DNA遗传信息……RNA……蛋白……表现遗传性质。 病毒RNA能自我复制，同时也能做为mRNA知道蛋白合成。 病毒RNA……逆转录……DNA……致癌变 中心法则： 第一节 DNA的生物合成 一、半保留复制：DNA复制时，亲代DNA的双螺旋先解旋或分开，然后以每条链为模板按碱基配对原则，在这两条链上各形成一条互补链的复制过程。 半保留复制是双链DNA普遍采用的复制机制。 二、DNA复制有关的酶和蛋白质 DNA合成过程： dNTP + 模板＋引物 DNA＋PPi 1 引物合成酶（引发酶，primase） 以DNA为模板合成一段RNA，作为合成DNA的引物。 在一定程度上可以用dNTP代替NTP作为底物合成。 2 DNA聚合酶（DNA polymerase）：（大肠杆菌） DNA聚合酶 I(Kornberg 酶)：多功能酶 5’－3’ 聚合酶：在底物和模板以及引物存在下，可将脱氧核糖核酸加到具有3’－OH末端的多核苷酸链上，合成DNA，合成方向5’－3’。 3’－5’ 外切酶活性：有校对功能,错配后，聚合停止，切除后继续。 5’－3’ 外切酶活性：有切除DNA损伤部分以及引物的作用 DNA聚合酶 II：可能在修复由紫外造成的损伤中起作用? DNA聚合酶 III：10种22个亚基+锌原子 5‘-3’DNA聚合酶活性 3‘外切酶活性 3 真核细胞中的聚合酶 四种：聚合酶?，?， ?，? 聚合酶?，?复制染色体DNA 4 DNA连接酶 催化DNA双链中的切口处的相邻的5’－磷酸基和3’－羟基形成磷酸酯键。 不可以催化两条游离的DNA单链连接。 5 拓扑异构酶 DNA复制解开双链时产生扭曲张力的释放解释 通过DNA旋转(早期观点) 拓扑异构酶 拓扑异构酶：催化DNA拓扑异构反应的酶叫拓扑异构酶（改变拓扑环或DNA双链的互缠数） 拓扑异构酶 I（转轴酶）：和DNA结合后形成稳定的复合物，并催化DNA一条链发生断裂和再连接。从而改变DNA的拓扑连环数和超螺旋数（大肠杆菌）减少负超螺旋。 拓扑异构酶 II （旋转酶）：使DNA的两条链同时断裂并再连接引入负超螺旋（100个/分，需要ATP），并消除DNA复制叉前进时产生的扭曲张力。 I 和II 型酶协同作用，控制DNA的拓扑结构。 6 解螺旋酶 通过水解ATP将DNA双链打开。1对碱基/2ATP rep protein 7 其他蛋白因子 单链结合蛋白（SSP）：稳定被解开的DNA单链，阻止和保护其不被核酸酶降解 dna A :识别并结合4X9序列，负超螺旋包裹dna A, 溶解3X13（引发连续变性） HU蛋白:类组蛋白，参与dna A活动 引发前体（前引物蛋白）：由6种蛋白：dnaB（解旋酶）,C ,n,n’,n’’ and I 功能： 和RNA引发酶结合组装成引发体 引发体结合到随后链的模板上 具有识别合成起始位点的功能 间断引发RNA合成（引物合成） 沿5’-3‘移动 复制起始位点oriC 复制从DNA的分子的特定位置开始，用ori or o表示 245bp, 3X13bp + 4X9bp 富含AT此段产生的瞬时单链和SSP结合 原核生物只有一个复制原点 真核细胞有多个复制原点 三、DNA复制 半不连续复制：一条链相对连续合成，另一条链的合成不连续复制方式。 复制过程： 双链解开 RNA引物合成 DNA链延长 终止 切除RNA引物 填补空缺 连接相邻的DNA片段 （一）双链解开 dnaA+HU protein 复制体 复制起始θ结构形成后，在复制叉上结合各种和复制有关的酶和辅助因子，形成一个复合体 复制体形成（8种蛋白介入） 起始复合体：DnaA+HUprotein +ATP 开放复合体：3X13被DnaA 打开，DnaB and DnaC进入 形成复制眼和复制叉，即形成θ结构 各种酶和蛋白进去在复制叉处形成复制体，引发并进行DNA复制 （二）RNA引物合成(引发) （三）DNA链延长  终止反应 终止蛋白和终止子结合抑制复制体的解螺旋酶活性，防止复制叉通过终止位点。 大肠杆菌的复制终止点就是两个复制叉的汇合点 Okazaki fragment 到一定长度后，新老片段接近时 DNA聚合酶 I 切除RNA引物 空隙由DNA聚合酶 I催化填补一段DNA DNA连接酶连接相邻的DNA片段 修复掺入DNA链错配的碱基 形成两个DNA双股螺旋分子（半保留复制） 四、逆转录：60年代提出，70年发现逆转录酶，目前发现在高等真核生物的RNA肿瘤病毒中都