组织化学染色.ppt

特殊染色在临床病理学中的应用 染色的意义和目的 用染料对组织切片进行处理，使组织中的不同成分被染上相应的颜色，产生不同的折射率，以利于光镜观察和分析。病理染色属于生物性染色的范畴。 应用某些能与组织细胞化学成分特异性结合的显色剂，显示组织或细胞的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等，称特殊染色（Special staining） 。 特殊染色（special staining） 染料和染色的原理 一、染料的特点： 组织病理学染料是生物学染色剂 对所染组织成分具有亲和力 染色剂中同时具备发色团和助色团才具有染色功能 发色团是使染料显色的化学团（色原），一种染料由一个或多个发色团，染料颜色取决于发色团多少和强弱。 助色团指使色原产生电离成为盐类，对被染物产生亲和力的原子团 染料和染色的原理 二、染料的分类 染料的来源分类：天然和合成染料 化学反应分类：碱性染料、酸性染料、中性染料 用途分类： 细胞核染料：苏木素，核固红，结晶紫等 细胞质染料：伊红，酸性复红，苦味酸等 脂肪染料：油红O，苏丹III，苏丹IV 纤维结缔组织染料：苦味酸，亮绿等 染料和染色的原理 三、染料的原理 物理机制： 毛细管渗透作用：染色剂沿组织间微孔渗透到组织中。 吸收或溶解作用：组织吸收或溶解染料而着色，如脂肪染色 吸附作用：染料的色素粒子浸润组织中，因分子引力，色素粒子被吸附而染色 例如脂肪染色: 苏丹类染色剂在脂质中的溶解度＞酒精中的溶解度 溶解于酒精的苏丹类染色剂与组织中的脂质接触时，染色剂就从溶液中“转移”到脂质中，从而使脂质着色。 染料和染色的原理 三、染料的原理 化学机制： 组织和细胞中含有碱性和酸性物质，分别与染料中的阳离子和阴离子结合。 如HE染色：细胞核主要由核酸构成，与碱性染料-苏木素结合，而胞浆主要由碱性物质构成，与酸性染料-伊红结合。 普通染色：又称常规染色，即指HE染色（haematoxylin and eosin HE） 特殊染色：除HE以外的所有染色，显示特定的组织结构和成分。 单一染色：用一种染料进行的染色，如甲苯胺蓝染幽门螺杆菌 多色染色：用两种以上染液染色的方法，如三色染色 对比染色：又称复染或衬染，先将某一成分或结构染色后，再用另一种染料染其他成分，如苏木素衬染细胞核 染色的常用术语 进行性染色：渐进性染色，采用低浓度的染液，使组织成分着色自浅入深，直到达到合适强度， 退行性染色：又称后退性染色，先使组织着色过度，再用某些溶液脱去多余染液，达到合适染色强度 媒染剂：具有促进染色能力，对染料和组织都有亲和力并与染料和组织结合在一起的试剂。如硫酸铝钾等 染色的常用术语 促染剂：促使染料着色，增强染色能力，但本身不参与染色反应，如乙酸 异染性染色：组织经过盐基性染料染色后，出现与染料不同的颜色 分化：指用某种溶液选择性脱去过深的着色，并使不应着色的组织细胞成分脱色的过程，HE染色时的盐酸酒精分化 蓝化作用（返蓝）：苏木素在酸性条件下呈红色，碱性条件下呈蓝色，HE染色时在酸分化后，再用碱性水使核变蓝，称蓝化 染色的常用术语 按照染色方法分类 一般方法分类：常规染色，特殊染色等 按主要组织和细胞成分分类：结缔组织染色，肌组织染色，神经组织染色 按染色对象种类分类：切片染色法，组织块染色法，大体标本染色法 染色方法的分类 按发明者姓名命名：如Van. Gieson（VG）染色 按所有染料分类：如苏丹IV染色，锇酸染色 按所染组织分类：如网状纤维染色 其他分类： 染色方法的命名 选择适当的组织处理方法：包括固定液和切片的选择，如脂肪和酶类染色需冰冻切片 染色液的有效期和保存方式 染色液的浓度和pH值 染色时间的控制 染色前切片的预处理：如脱甲醛色素，脱汞盐固定液的汞结晶等 染色中易出现的问题和对策 注意特染的应用范围，如某种病变应用什么方法染色才能达到目的，一般根据HE切片所见，选择适当的特染方法。 必须掌握各种特殊染色的结果，避免导致错误的结论或严重的误诊，如在网染时把胶元纤维误以为网状纤维。 应做阳性切片作对照，保证染色结果的可靠性。 染色所用的器皿都必须清洗。 染色中易出现的问题和对策 常用染色方法和应用 结缔组织由细胞和细胞间的骨架成分构成，分为无定形的间质（如硫酸盐和非硫酸盐黏多糖）和定形或纤维型间质（如胶原纤维，弹力纤维。网状纤维）。各种纤维成分的识别有助于病理学的诊断和鉴别诊断。 结缔组织染色 网状纤维的特性 网状纤维是构成组织的网状支架 广泛分布于实质器官内，其中最丰富的区域是肝脏、脾脏、淋巴结、骨髓、基膜、血管等 形态学上为交织成网的纤细纤维 化学成分为