优秀研究生答辩幻灯片.分析.pptx

欢迎各位专家莅临指导单肺通气诱发肺损伤时兔肺组织线粒体转录因子A表达的变化及乌司他丁的干预效应我将从以下几个方面向大家介绍我的研究论文。首先是研究背景单击单肺通气(one-lungventilation，OLV)的应用已有50多年的历史，是指患者经支气管导管仅利用单侧肺(非术侧肺)进行通气的方法。主要目的是提供良好的手术视野，避免患侧肺对健侧肺的污染，减少呼吸运动对手术操作的干扰，随着外科技术的发展，OLV已广泛应用于心胸外科及脊柱手术的麻醉。GothardJ.Lunginjuryafterthoracicsurgeryandone-lungventilation.CurrOpinAnaesthesioli,2006,19(1):5-105060708090100开胸手术中1h2h3h长时间单肺通气萎陷侧肺快速复张吸入高浓度氧急性肺损伤FiO2：%手术操作细胞内氧自由基增多可介导IL-1、TNF-α等前炎性因子增多，使中性粒细胞募集诱发炎症反应。中性粒细胞可释放髓过氧化物酶（MPO），MPO主要功能是利用过氧化氢和氯离子产生次氯酸盐（HOCl），并形成具有氧化能力的自由基单肺通气诱发肺损伤的机制线粒体是参与细胞能量代谢的重要细胞器，线粒体功能障碍可导致组织缺氧。细胞内氧自由基增多，首先攻击线粒体基因。RuchkoM,GorodnyaO,LeDouxSP,etal.MitochondrialDNAdamagetriggersmitochondrialdysfunctionandapoptosisinoxidant-challengedlungendothelialcells.AmJPhysiolLungCellMolPhysiol,2005,288(3):L530-535线粒体是参与细胞能量代谢的重要细胞器，线粒体功能障碍可导致组织缺氧。细胞内氧自由基增多发生氧化应激反应，主要损伤线粒体基因。线粒体线粒体呼吸链功能蛋白线粒体转录因子A线粒体转录因子A（mtTFA）是mtDNA转录翻译线粒体结构蛋白和功能蛋白的重要启动子。其高表达可使mtDNA数量增加，对维持mtDNA稳定具有重要意义。mtDNA是转录翻译线粒体呼吸链功能蛋白的细胞核外重要遗传物质FukuohA,KangD.MethodsforassessingbindingofmitochondrialtranscriptionfactorA(TFAM)toDNA.MethodsMolBiol,2009,1760(2):87-101线粒体DNA是转录翻译线粒体呼吸链功能蛋白的细胞核外重要遗传物质，单击线粒体转录因子A是这一复杂过程的重要启动子之一，其高表达可使mtDNA数量增加，对维持线粒体DNA稳定有重要意义乌司他丁含有143个氨基酸的糖蛋白，主要通过肾脏代谢,给药后12h可通过尿和粪便排泄。乌司他丁是分离纯化成年男性尿液得到的蛋白水解酶抑制剂。InoueK,TakanoH,YanagisawaR,etal.Antioxidativeroleofurinarytrypsininhibitorinacutelunginjuryinducedbylipopolysaccharide.IntJMolMed,2005,16(6):1029-1033乌司他丁是临床上常用的蛋白水解酶抑制剂，对其结构功能研究较为深入，临床研究发现，乌司他丁具有减轻内毒素、油酸、手术操作、机械通气等引起的肺损伤。？？本研究通过建立兔单肺通气致肺损伤模型，拟探讨单肺通气诱发肺损伤时肺组织线粒体转录因子A表达的变化及乌司他丁的干预效应，为临床防治单肺通气诱发急性肺损伤提供理论依据。动物选择及分组根据文献，单肺通气模型动物种类：本实验选用国内外研究单肺通气最常用的动物：新西兰大白兔根据文献，单肺通气动物模型有以下几种，本实验选用国内外研究单肺通气最常用的动物：新西兰大白兔。单击选择健康雄性大白兔24只，单击采用随机数字表法，随机分为3组：双肺通气组、单肺通气组、乌司他丁干预组。单击D组双肺通气3h，O组和U组左肺通气2h后再双肺通气1h。通气参数双肺通气时VT为24ml、单肺通气VT为12ml、FiO2100%，通气频率40次/min，I:E为1:2。通气结束后开胸，取双侧肺尖部组织。模型建立与标本采集D组及O组在通气即刻静脉注射等量生理盐水。U组通气即刻静脉注射乌司他丁50kU/kg这是我们按照文献方法自制的双枪气管插管单击D组、O组通气即刻静注生理盐水，U组静注乌司他丁50KU/kg单击D组双肺通·气3h，O组和U组左肺通气2h后再双肺通气1h。通气参数设为双肺通气时潮气量为24ml、单肺通气为12ml、吸入氧浓度100%，通气频率40次每分，吸呼比为1:2单击检测方法取肺尖部组织装入冻存管，液氮冻存24h后