EpiTect PLUS DNA重亚硫酸氢盐处理试剂盒中文说明书套件协议1.docVIP

窗体顶端 EpiTect PLUS?DNA重亚硫酸氢盐处理试剂盒中文说明书套件协议1 DNA亚硫酸氢钠试剂盒（货号59124）MinElute? DNA spin columns, DNA Protect Buffer, and Buffer BD应该保存在2–8°C. 所有其他buffers and Bisulfite Mix 15–25°C 下保存6个月。溶解后的 Bisulfite Mix能够在–20°C保存4个星期。 有关更多信息，请参阅的EpiTect重亚硫酸盐转化手册“，可以在/。提供技术援助，请拨打免费电话00800-22-44-6000，或找到/接触区域的电话号码。开始前的注意事项Buffer BW里面加入30ml无水乙醇，室温 15–25°C 下保存。 往Buffer BD里面加入27ml无水乙醇，储存在4°C冰箱保存（2-8°C） 添加310μL无RNase的水carrier RNA中后分装在-20°Ccarrier RNA是不需用要的。 重亚硫酸盐转化的DNA取亚硫酸氢所需的，加入800μL无RNase的水旋涡直到完全溶解混合。这可能需要长达5分钟。溶解可能需要的加热至60°C200μL的PCR管中设立亚硫酸氢钠反应根据表1关闭PCR管彻底混合亚硫酸氢钠反应。DNA保护缓冲应该变成蓝色，表示充分的混合和正确的H值。如果使用热循环仪不允许你进入反应体积（140微升），设置到仪器最大设置。PCR管放置在热循环，并开始孵化。转换的DNA可以热循环不损失性能。表1 亚硫酸氢钠反应设置 高浓度样品（1ng-2μg） 低浓度样品（1ng-500ng） 组成 每个反应量（μl） 每个反应量（μl） DNA solution 变量（最多20μL） 40μL） RNase-free water 变量■ 变量▼ Bisulfite Mix 85 85 DNA Protect Buffer 35 15 Total volume 140 140 DNA液和RNase-free water体积之和必须是20μL ▼ DNA液和RNase-free water体积之和必须是40μL 表2 重亚硫酸盐转化热循环条件 时间 温度 变性 5 min 95°C 孵化 60°C 变性 95°C 孵化 60°C 变性 95°C 孵化 60°C 保持 20°C 转换的DNA可以留在热循环夜有任何性能损失。对于最新的许可信息和特定产品的免责声明，请参阅相应QIAGEN公司的试剂盒手册或用户手册。商标：QIAGEN公司，EpiTect? MinElute?（QIAGEN公司组）。10座机电话号码/2011?2011?QIAGEN公司，保留所有权利。采样及检测技术