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第一章制片方法及准备工作

3、茎 4、花 花药的发育 * * 植物显微技术 计划学时:48 讲课16 实验32 主要参考书: 1.王灶安主编《植物显微技术》 2.曾小鲁主编《实用生物学制片技术》 3.郑国錩主编《生物显微技术》 4.黄承芬,杜桂森编著《生物显微制片技术》 5.郑若玄编著《实用细胞学技术》 6. 李和平主编《植物显微技术》 内容简介 植物制片的方法及准备工作 石蜡法制作原理与方法 其他制片方法 植物显微化学制片 半薄切片和超薄切片 显微镜的主要光学部件及性能 各类显微镜简介 几种显微技术的应用 显微摄影技术 研究论文题目: 几种常绿植物(海桐、洋玉兰、冬青卫矛、桂花、黄杨等)叶片解剖结构研究 几种药用植物(地黄、黄精、丹参、乌头、麦冬等)肉质根解剖结构特征 及其增粗生长机理研究 变态器官萝卜、胡萝卜、生姜、莲藕等解剖结构研究 松属植物(雪松、白皮松、油松、华山松等)表皮特征及叶片解剖结构研究 蔷薇科李属植物(日本樱花、晚樱、红叶李、碧桃)腺体结构特征研究 第一章 植物制片的方法及准备工作 植物制片的方法 切片法 用切片刀或刀片将各种组织切成薄片制成玻片标本的方法。 1.徒手切片法 2.石蜡切片法 (切片厚度8-10μm) 3.火棉胶切片法 4.冰冻切片法 5. 滑走切片法 6.半薄切片法(切片厚度1-2μm) 7.超薄切片法(切片厚度50-60nm) 非切片法 将小形植物体或较大植物体的一部分或其组织,不用刀切成薄片而制成玻片标本的方法。 1.整体装片法 2.涂片法 3.压片法 4.平铺法 5.离析法 6.扫描电镜样品制备 制片前的准备工作 制片用的主要设备 1、显微镜 2、石蜡包埋工具 恒温箱 用于浸蜡、烤片及染色加温等。 包埋箱(熔蜡箱) 用于浸蜡、包埋。温度调节在60℃。 3、切片工具 旋转切片机 滑走切片机 冰冻切片机 超薄切片机 1、旋转切片机 2、滑走切片机 2、滑走切片机 4、冰冻切片机 5、超薄切片机 6、切片刀及其附件 7、自动磨刀机 8、染色工具 染色缸 立式染色缸 卧式染色缸 染色皿 9、载玻片和盖玻片 载玻片的规格 76×26mm,厚度:1~1.2 mm。 盖玻片的规格 方形:18×18 mm,20×20mm,22×22mm,24×24mm。 长盖玻片: 50×24 mm或60× 24mm。 厚度:0.13~0.17mm。 盖玻片规格 小型真空泵 10、真空泵 用于抽出材料中的气体。 11、电热温台 5 90 90 10 85 85 15 80 80 25 70 70 45 50 50 65 30 30 应加蒸馏水的量(ml) 量取95%酒精的量(ml) 将要配制的酒精浓度(%) 常用溶液的配制 各级酒精浓度的配制 低浓度溶液的配制 1%番红水溶液的配制:1g番红溶于100 ml蒸馏水中。 0.1%固绿酒精溶液的配制:0.1g固绿溶于100 ml95%的酒精溶液中。 第二章 石蜡法制片原理与方法 材料的选择、采集与分割 取样前应注意的问题 1.研究正常结构时,应选择健全而具有代表性的部位取材;采取病理材料时,除取其病变的部位外,还应从病变的中央部分向四周,连同正常组织一起采取,以利观察分析。 2.采取标本前,要根据制片的要求,选择并配制固定液,取材后应立即投入固定液,以防组织自溶和腐败。 3.切取材料时,刀必须锐利,动作要快但要仔细,切割时切勿拉锯式的来回切取,镊取时须轻夹轻放,尽量不损伤材料。 4.材料尽可能新鲜,并切成所需的大小。这样有利于固定液的透入。 5.取材时要详细记录日期、采集地点、标本名称、时期、取材部位、断面和固定液等。 样品采集与分割 1、叶 取样部位 取样部位 玉米叶 2、根 主根 侧根 不定根 一级侧根 二级侧根 根尖分区 根的初生构造 有丝分裂、核型分析

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