第十九章 氨基酸 、蛋白质、核酸.pptVIP

1、掌握二十种常见氨基酸的名称和分类，理解其结构；掌握氨基酸的两性和等电点，在高于或低于它们的等电点的水溶液中的构造式； 2、掌握氨基酸与茚三酮的反应；了解氨基酸的合成法和发酵法；掌握多肽的一般结构，理解多肽的测定法（N端、C端测定法）、部分水解；了解多肽的一般合成法； 3、掌握蛋白质的分类、分子结构（一级、二极、三级结构），了解蛋白质的四级结构； 4、掌握蛋白质的性质：两性、等电点、水化、变性、鉴定、水解（酸性和碱性水解）； 5、掌握核苷酸、核酸（DNA和RNA）的表示式；了解基因指导蛋白质的合成m—RNA，t—RNA； 6、了解酶的一般概念。 一、 蛋白质的组成 二、 蛋白质的分类 三、 蛋白质的结构 四、 蛋白质的性质 一、 蛋白质的组成 4、蛋白质的四级结构 蛋白质是高分子化合物，其分子颗粒的大小在1-100nm之间，己在胶体范围内，因此，蛋白质溶液具有胶体溶液的典型性质，如丁达尔现象、布郎运动、不能透过半透膜、能够电泳等性质。 生物碱试剂（不可逆沉淀、变性沉淀）：苦味酸、三氯乙酸等与蛋白质结合生成沉淀。 + 物理因素（不可逆沉淀、变性沉淀）：在加热、加压、紫外线等物理因素作用下，蛋白质的构象也会被破坏而沉淀。 4、蛋白质的变性： 当蛋白质受到物理或化学因素影响时，可使蛋白质二、三级结构的结合力遭受破坏，肽链松散，导致蛋白质在理化和生物性质上的改变，这种现象称为蛋白质的变性。 变性条件： 物理因素：干燥、加热、高压、振荡或搅拌、紫外线、X射线、超声等等。 化学因素：强酸、强碱、尿素、重金属盐、生物碱试剂（三氯乙酸、乙醇等等）。 变性后的特点： ① 丧失生物活性 ②变性蛋白质通常都是固体状态物质，不溶于水和其它溶剂，也不可能恢复原有蛋白质所具有的性质。所以，蛋白质的变性通常都伴随着不可逆沉淀。溶解度降低 ③ 易被水解（对水解酶的抵抗力减弱）。 变性作用的利用： ① 消毒、杀菌、点豆腐等； ② 排毒（重金属盐中毒的急救）； ③ 肿瘤的治疗（放疗杀死癌细胞）； 2、 羧基的保护 Pd-C / H2 3、 接肽方法 脱水 H2 / Pd-C 去保护基 二环己基碳二酰亚胺 (DCC) 1、测定分子中是否存在二硫键 2、检测氨基酸的组成及其相对比例 3、 测定肽中各氨基酸的排列顺序 三、多肽结构的测定 1、 测定分子中是否存在二硫键: 多肽或蛋白质分子中有二硫键 ，需要切断。其方法是用过酸氧化。 2、检测氨基酸的组成及其相对比例 该工作由氨基酸自动分析仪完成 在N-端引入具有特定基团的标记化合物，这种标记基团有颜色、荧光、紫外吸收等性质，然后分离鉴定具有这种基团的氨基酸衍生物。 3、测定多肽中各氨基酸的排列顺序 1）N-端氨基酸单元的分析 DNFB + Gly-Ala-Phe DNFB-Gly-Ala-Phe DNFB-Gly Ala Phe H+ 水解 105oC pH=8-9 室温 二硝基氟苯法（Sanger法） 肼解法： 当多肽（或蛋白质）与无水肼在100℃反应5-10h后，除C端氨基酸外，所有氨基酸都转变成相应氨基酸的酰肼，C端氨基酸则以游离氨基酸放出。 2）C-末端测定 NH2-NH2 100oC 5-10h Gly-Ala-Phe GlyNHNH2 AlaNHNH2 Phe 3.多肽的选择性水解 某八肽完全水解后，经分析氨基酸的组成为：丙、亮、赖、苯丙、脯、丝、酪、缬。端基分析：N-端为丙,C-端为亮。胰蛋白酶催化水解：分离得到酪氨酸、一种三肽和一种四肽。用Edman降解分别测定三肽、四肽的顺序，结果为：丙-脯-苯丙；赖-丝-缬-亮。 第二节 蛋白质 蛋白质存在于所有的生物细胞中，是构成生物体最基本的结构 物质和功能物质。因此，蛋白质是生命活动的物质基础，它参与了 几乎所有的生命活动过程。