01.液态活检技术及其临床应用精选.pptx

讲者介绍应建明，博士，中国医学科学院肿瘤医院病理科副主任，硕士研究生导师。1998年和2000年分别获得北京医科大学医学学士和硕士学位，2007年获得香港中文大学医学博士学位。2000年起在中国医学科学院肿瘤医院病理科从事肿瘤病理诊断，并负责肿瘤分子病理检测。2012年获北京市优秀中青年医师，现为中华医学会病理学分会及中国抗癌协会肿瘤病理专业委员会青委会副主任委员，中国抗癌协会淋巴瘤专业委员会青年委员。《中华病理学杂志》编委。已发表专业论文60余篇。液态活检技术及其临床应用应建明中国医学科学院肿瘤医院jmying@cicams.ac.cn传统的肿瘤诊断技术传统肿瘤诊断技术病理检验诊断影像学检测病理组织检查（HE，IHC）血清标志物检测（CEA,PSA)核磁共振成像（MRI）正电子成像术（PET-CT）X射线断层扫描术（XRAY,CT）超声波检测（B超）内窥镜（Endoscope）分子病理检测（FISH,RT-PCR,NGS）传统的肿瘤诊断存在的问题早期筛查：标记物不统一,方法不够灵敏或是特异性不足。临床诊断:影像学：较灵敏，特异性不足，对病灶大小有要求。病理学：金标准，但是需要组织样本，取样会带来创伤和扩散风险，很多晚期患者无法取样或取样不足。治疗/复发转移监测：影像学：结果普遍存在滞后性。血清标志物：较灵敏，但是特异性不足；有些类型癌症没有合适的血清标志物。2015年十大突破技术--液态活检技术MITTechnologyReview杂志发布了2015年度十大突破技术(10BreakthroughTechnologies2015)的榜单。液态活检技术光荣上榜。液态活检：快速、简便、无痛苦、无创伤的癌症血液检测方法传统而又崭新的检测技术--“液态活检”“液态活检”的定义：Aliquidbiopsyisaliquidbiomarkerthatcanbeeasilyisolatedfrommanybodyfluidsblood,saliva,urine,ascites,pleuraleffusion,etc.)and,aswellasatissuebiopsy,arepresentativeofthetissuefromwhichitisspread.--ChristianRolfo,BiochimicaetBiophysicaActa,2013.“液态活检”的标记物CTCsctDNA(cfDNA)主要指来自于抗凝的外周血全血，完整的肿瘤细胞主要指来自于抗凝血外周血的血浆，片段化的DNA片段一般认为来源于肿瘤原发灶/转移灶肿瘤瘤细胞凋亡/坏死释放的DNA片段活细胞，一般不宜长期保存提取纯化后的核酸，可以保存可以用于细胞学形态、结构分析；也可以分析细胞DNA、RNA、蛋白质等各类标志物一般用于DNA突变监测、甲基化等DNA修饰相关分析用于病情评价、预后判断，肿瘤早期诊断潜力不明确用于个体化治疗，肿瘤早期诊断潜力相对明确还有miRNAs，Peptides，Exosomes（外泌体），Secretomes（分泌物质组）等。ctDNA（circulatingtumorDNA），即循环肿瘤DNA，从字面意思来讲，指的是由肿瘤细胞释放到血液循环系统中的DNA。但是在了解ctDNA之前，我们要知道另一个与之相关的概念——cfDNA。cfDNA（cell-freeDNA），或者叫血浆游离DNA，是血浆中游离存在的DNA，它们有的来自于正常细胞，有的来自于异常细胞（如肿瘤细胞），还有部分来自于我们外部（如病毒DNA）。来源：1、来自于坏死的肿瘤细胞2、来自于凋亡的肿瘤细胞3、来自于肿瘤细胞分泌的外排物什么是ctDNA?人们逐渐明白，cfDNA中携带肿瘤特有突变的那一小部分DNA，确确实实是由肿瘤细胞释放出来的，ctDNA的研究终于与肿瘤关联起来。ctDNA的发现在几乎所有种类的癌症中，都检测到了ctDNA所带有的标志性突变，并且肿瘤越晚期，病情越严重，肿瘤的恶性程度越高，ctDNA特有突变的频率就越高。一项针对15种癌症进行的ctDNA测序研究显示，分别有47%，55%，69%，82%的I-IV期癌症病人中能检测到高于一定频率的ctDNA突变；而另一项使用更高灵敏度测序技术的研究则表示，对于II期以上的病人，均能100%检测到突变。不同分期癌症的ctDNA检出情况不同癌症种类的ctDNA检出情况CtDNA临床应用领域CtDNA作为一种新的肿瘤标志物，将在肿瘤的诊断、治疗及预后检测等方面发挥重要的作用，尤其是对于一些不具有典型临床症状、检查无特异性和诊断困难的肿瘤可避免复杂的、具有创伤性的活检。ctDNA来自肿瘤细胞的体细胞突变，不同于遗传突变的是，遗传突变存在于体内每个细胞。因此，ctDNA是一种特征性的肿瘤生物标记物，并且还可以被定性、定量和追踪