06第六章细菌的遗传课稿.pptVIP

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第六章 细菌的遗传分析 (3学时) 廊坊师范学院生命科学学院 遗传学教研室 第一节 细菌的细胞和基因组 细菌的细胞 Bacteria Have Circular Chromosomes 第二节 细菌的结合与染色体作图 一.大肠杆菌结合现象的发现 Amet-bio-strs × 加链霉素 Bthr-leu-thi-strr ↓ 基本培养基+str: 出现菌落 第三节 中断杂交与重组作图 一.中断杂交实验原理 第四节 F’因子与性导 第五节 细菌的转化与转导作图 一.细菌的转化与遗传作图 例:P1→供体:thr+ leu+ azir ×thr- leu- azis 受体 作 业 题 1、供体菌株为Hfr arg-leu+aziSstrR,受体菌株F-arg+leu-aziRstrS。为了检出和收集重组体F-arg+leu+aziR,应用下列哪一种培养基可以完成这一任务,为什么其他的培养基不可以? (1)基本培养基加链霉素 (2)基本培养基加叠氮化钠和亮氨酸 (3)基本培养基加叠氮化钠 (4)在选择培养基中不加精氨酸和亮氨酸,加链霉素 (5)基本培养基加链霉素和叠氮化钠 3.在普遍性转导中,供体大肠杆菌细胞的基因型是trpC+pyrF-trpA-,受体细胞的基因型是trpC-pyrF+trpA+。由P1噬菌体媒介转导,对trpC+进行选择,用选择的细胞进一步检查其他基因的转导情况,得到以下的结果: 基因型后代数目 trpC+ pyrF- trpA- 274 trpC+ pyrF+ trpA- 279 trpC+ pyrF- trpA+ 2 trpC+ pyrF+ trpA+ 46 试问: (1)这3个基因的次序是什么? (2)trpC和pyrF以及trpC和trpA的合转导频率是多少? (3)假定P1染色体长为10μm,这些基因之间的物理图距是多少? 4.由一个野生型菌株抽提DNA,用来转化一个基因型为 的突变型菌株。不同类转化子的菌落数目如下: trp-? his-? tyr+? 685?? trp-? his+? tyr-? ? 418 trp-? his+? tyr+? 3660? trp+? his-? tyr-?? 2660 trp+? his-? tyr+? 107?? trp+? his+? tyr-? ? 1180 trp+? his+? tyr+? 11940? a.????3个基因间的连锁距离是什么? b.? 它们的连锁次序如何? 性导在大肠杆菌的遗传学研究中的作用 (1) F`因子可自主复制; (2) 形成部分二倍体可用作互补试验测定两突变的关系; (3) 确定部分二倍体中两基因的显隐关系; (4) 利用两基因的“共性导率作图”。 转化:指外源DNA片段不经中间媒介体直接进入感受态细胞进行基因重组形成重组体的过程。 转化子:通过转化而形成的重组体。 感受态细胞:能接受外源DNA分子并被转化的细菌细胞。 感受态因子:促进转化作用的酶或蛋白质分子。 转化机制: 转化基因间关系及其确定(共转化) DNA低浓度时,转化频率与转化的DNA浓度呈正比关系 不连锁 1/4 1/2 1/2 1/2 连锁 1/2 1/2 1/2 1/2 A与B 关系 A与B共转化率下降比率 B转化率下降比率 A转化率下降比率 DNA浓度 下降比率 Nester等用枯草杆菌进行了如下实验: trp2+ his+ tyr1+ × trp2- his- tyr1- 二.细菌的转导与遗传作图 LT22 phe-trp-tyr-his+ × LT2 phe+trp+tyr+his- 1、转导的发现 1952年 J.Lederberg ,N. Zinder实验 结果10-5频率出现野生型菌株。(基本培养基) LT22菌液涂布在基本培养基上出现野生型菌落 某种滤过因子将LT-2的基因传递给LT-22, 后来的一系列实验证明该滤过因子为P22噬菌体。 Lederber 实验的解释: LT22是携带了P22原噬菌体的溶源性细菌,LT2是对P22敏感的非溶源性细菌。 转导:以噬菌体作为媒介,把一个细菌(供体)的遗传物质转移到另一细菌(受体),中进行基因重组的过程叫转导。 转导分为普遍性转导和局限性转导两类。 2、普遍性转导 普遍性转导:供体细菌的任何一个基因都可能被转移,且几率相等,这种转导为普遍性转导。转导颗粒:将细菌染色

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