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TILLING 技术的原理与方法述评 摘要 TILLING，即Targeting Induced Local Lesions IN Genomes（定向诱导基因组局部突变技术），是由美国 Fred Hutchinson 癌症研究中心Steven Henikoff 领导的研究小组发展起来的，是一种全新的反向遗传学研究 方法。TILLING 技术借助高通量的检测手段，快速有效地从由化学诱变剂（EMS）诱变过的突变群体中鉴定 出点突变。目前，TILLING 已被应用于多种生物的研究中。本文系统介绍了TILLING 技术的基本原理、技术 路线及其技术优势，同时列举了TILLING 的应用实例，并展望了TILLING 技术的应用前景。 关键词 TILLING, 点突变, 检测 Introduction to the TILLING Strategy Wu Haibin1,2 Zhu Rucai2 Zhao Degang1* 1Guizhou Key Laboratory of Agricultural Bioengineering, Guizhou University, Guiyang, 550025 2 Hainan Provincial Key Laboratory of Crop Molecular Breeding, Sanya, 572025 *Corresponding author, degangzhao@ ABSTRACT TILLING，Targeting Induced Local Lesions IN Genomes，was developed by Dr. Steven Henikoff s Research Group of Fred Hutchinson Cancer Research Center in Seattle, Washington, USA. TILLING is a novel reverse genetics strategy that provides a completely solutions for high throughput and low cost discovery of induced point mutations in populations of chemically mutagenized individuals. Recently TILLING has been applied to lot of organisms such as arabidopsis, tomato, maize, rice, soybean, lotus, nemetode, mouse, zebrafish, drosophila etc. This paper briefly introduced the TILLING methodologies and its advantages, and also listed the Arabidopsis TILLING Project as an application case. KEYWORDS TILLING, Point mutations, Detection TILLING， 即Targeting Induced Local Lesions IN Genomes（定向诱导基因组局部突变技术），是由 美国Fred Hutchinson 癌症研究中心Steven Henikoff 领导的研究小组发展起来的，是一种全新的反向遗传学研究方法。主要的技术论文先后发表在PlantPhysiology、Nature Biotechnology、Genome Research等学术刊物上。TILLING 已成为自动化反向遗传学解决方案的关键词，以美国为首的北美实验室借助高通量的TILLING 技术，启动了拟南芥TILLING项目（Arabidopsis TILLING Project），获得美国国家科学基金会植物基因组计划（Plant Genome ResearchProgram，PGRP）大力资助，在ATP 项目组内 部已经实现了材料、DNA 样品及突变信息的充分共享，该项目在立项的第一年里就为拟南芥研究者们提供了超过100 个基因上的1000 多个突变位点。 国际上也有许多研究机构以TILLING 作为技术平台，展开了各自感兴趣的目标生物的功能基因组学研究。TILLING 技术借助高通量的检测手段，快速 有效地从由化学诱变剂（EMS）诱变过的突变群体中鉴定出点突变。目前，TILLING 已被应用于多种生物的研究中。本文系统介绍了TILLING 技术的基 本原理、技术路线及其技术优势，同时列举了TILLING的应用实例，并展望了T