分子生物学电子教案第十章分析.doc

第十章 原核生物基因表达调控 1．课程教学内容 (1) 原核生物基因表达调控的概述 (2) 乳糖操纵子 (3) 色氨酸操纵子的负调控 (4) 阿拉伯糖的操纵子 (5) 正调控系统和负调控系统 2．课程重点、难点 原核生物基因表达调控的一般机制、乳糖操纵子、色氨酸操纵子的负调控。 3．课程教学要求 （1）掌握原核生物表达调控的特点、方式和意义及相关概念； （2）掌握和理解乳糖操纵子和色氨酸操纵子的结构和作用机理； （3）了解其它调控方式。 ? ? 原核生物细胞的基因和蛋白质种类较少。如大肠杆菌基因组约为4.6×106bp，假如每个基因长1000bp，一个细菌就有4000个左右的基因能合成4000种左右的蛋白质，据估计一个细胞中总共含有107个蛋白质分子，如果每个基因等同翻译的话，任何一个多肽应有2500个拷贝，但是这些蛋白质并不是以相同拷贝存在于每个细胞中，有些蛋白质数目相当固定，另一些变化很大。例如，每个大肠杆菌细胞可以有约15000个核糖体，与其结合的约50种核糖体蛋白数量是十分恒定的，糖酵解体系的酶含量很大，其数目也极恒定，此外，如DNA聚合酶、RNA聚合酶等都是代谢过程中十分必需的酶或蛋白质，其合成速率不受环境变化或代谢状态的影响，这一类蛋白质的合成称为永久型，另一类型则称为适应型或调节型 ，这类蛋白质的合成速率明显地受环境的影响而改变。例如，一般情况下，一个大肠杆菌细胞中只有1-5个分子的β-半乳糖苷酶，但若将细胞培养在只含有乳糖的培养基中，每细胞中这个酶的量可高达几万分子，其他糖代谢的酶、氨基酸、核苷酸合成系统的酶类，其合成速度和总量都随培养条件的变化而改变。 细菌中所利用的大多数基本调控机制执行下列规则，一个体系在需要时被打开，不需要时被关闭，这种“开-关”活性是通过调节转录来建立的，也就是说mRNA的合成是可以被调节的。实际上，当我们说一个系统处于“off”状态时，也有本底水平的基因表达，常常是每世代每个细胞只合成1或2个mRNA分子，因而合成少量蛋白质分子，为了方便，我们通常用“off”这一术语，但必须明白所谓“关”实际意思是基因表达是特别低，很难甚至无法检测。 所有生物的遗传信息，都是以基因的形式储藏在细胞内的DNA分子中。随着个体的发育，DNA分子能有序地将其所承载的遗传信息通过密码子—反密码子实验，转变为蛋白质分子，执行各种生理生化功能完成生命的全过程。科学家把这个DNA到蛋白质的过程称为基因表达，对这个过程的控制称为基因表达调控时间和空间概念，掌握了基因表达调控的秘密，我们手中就有了一把揭示生物学奥妙的金钥匙。 基因表调控主要表现在以下几个方面 （1）转录水平上的调控 （2）mRNA加工成熟水平上的调控 （3）翻译水平上的调控 基因调控的指挥系统也是多样的，不同的生物使用不同的信号来指挥基因调控。原核生物中，营养状况和环境因素对基因表达起着举足轻重的影响。在真核生物尤其是高等真核生物中激素水平和发育阶段是基因表达调控的最得要手段，营养和环境因素的影响力大为下降。 一、??????? 基因表达的第一步是遗传信息从DNA分子转移到RNA分子的转录过程，这种RNA分子中一条反义链为模板，在依赖于DNA的RNA聚合酶的催化作用下进行的一种聚合反应，转录的可靠性是一个十分复杂的问题，它包括以下几个方面 （1）?????? （2）?????? RNA链中？ （3）?????? RNA聚合反应进行到底即如何保证合成完整的RNA？ （4）?????? 这种在转录水平上对基因表达的调控决定于DNA的结构、RNA聚合酶的功能、蛋白因子及其他小分子配基的相互作用。在研究转录及转录调控以前，我们先来分析一下原核与真核生物转录与翻译的特点：因为细菌mRNA在形成过程中与核糖体混合在一起，所以细菌的转录与翻译过程几乎发生在同一个时间间隔内，转录与翻译相偶联；真核生物中，转录产物只有从核内运到核外，才能被核糖体翻译成蛋白质。（图解） （一）转录调节的类型 根据某一体系代谢活性调节的类型，转录水平上的调节可分为如下几种方式：（1）代谢产物对基因活性的调节；（2）弱化因子对基因活性的影响；（3）降解物对基因活性的调节；（4）细菌的应急反应。 1、? 在降解代谢途径中，起始端的酶（一般指催化第一步反应的酶）的底物浓度往往决定是否合 成这一途径中的其他各种酶。相反，在合成代谢中，最终产物则往往是调节物质。在单顺反子mRNA翻译出蛋白质的体系中，该蛋白质可以充当自我调节的角色，其浓度决定了启动子的转录活性，每一调节类型的分子机理相差甚远。但一般可以分为负调节与正调节两种情况。 在负调节体系中，细胞中存在着抑制物，它使转录处于关闭状态，抗抑制物通常称为诱导物，在转录的开启中发挥重要作用。在正调节体系