第三章高效液相色谱新分解.ppt

第三章 高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography，HPLC) 第一节 概述 高效液相色谱法（HPLC） 出现时间：是20世纪60年代末70年代初发展起来的。 功 能：一种新型分离分析技术。 原 理：是在经典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论， 在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检 测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作 自动化的特点。 1．高效液相色谱法与经典液相色谱法 2．高效液相色谱法与气相色谱法 高效液相色谱仪的结构示意见图，一般可分为4个主要部分：高压输液系统，进样系统，分离系统和检测系统。此外还配有辅助装置：如梯度淋洗，自动进样及数据处理等。其工作过程如下：首先高压泵将贮液器中流动相溶剂经过进样器送入色谱柱，然后从控制器的出口流出。当注入欲分离的样品时，流经进样器贮液器的流动相将样品同时带入色谱柱进行分离，然后依先后顺序进入检测器，记录仪将检测器送出的信号记录下来，由此得到液相色谱图。 二、高效液相色谱组成系统 2．进样系统 高效液相色谱柱比气相色谱柱短得多（约5～30cm），所以柱外展宽（又称柱外效应）较突出。柱外展宽是指色谱柱外的因素所引起