组织氧内环境改变情况下LMP-1对鼻咽癌细胞系转移特性.pptVIP

院青年基金课题申报 HIF-1 与肿瘤侵袭转移关系密切 研究方法和技术路线 实验进展安排 2003年1月~ 2003年6月 试剂和材料的搜集以及预实验 2003年7月~ 2004年9月 实验过程即有关指标检测 2004年10月~2004年12月 结果分析和论文撰写 经费预算（万元） * * LMP-1对组织氧内环境改变情况下鼻咽癌细胞株转移特性的影响 申请人：揭 伟 病 理 教 研 室 2002年12月26日 立题依据 ? NPC容易发生早期转移和复发： 肿瘤的侵袭和转移涉及粘附、降解和运动三个主要步骤。此外，肿瘤血管新生对肿瘤转移也具有重要意义。 ? 60%患者常规治疗后2~3年内复发 50%患者早期颈部淋巴结转移 ? ? LMP-1 常氧时的结果 EBV感染与NPC关系密切 ? 信息转导通路：MAPK、 NFκB、 AP-1、PI3K 粘附分子异常: E-CD 基质蛋白溶解酶：MMP-2、MMP-9 促血管生成因子：VEGF 癌基因与抑癌基因：Ras、p53 ? 肿瘤组织低氧（hypoxia）是一个普遍的病理生理现象。低氧诱导因子（HIF-1）在介导低氧组织的适应性反应中起关键作用。已发现多个可被HIF-1调控的基因。 VEGF MMP-14 uPA、 PAI ? 细胞外基质溶解酶 血管生成 ? 多种因素调控HIF-1的表达： 低糖 药物 铁络合物 信号通路 癌基因与抑癌基因的异常： RAS、p53、 VHL、SRC LMP-1？ 低氧 LMP-1 HIF-1α HIF-1β LMP-1 HIF-1β HIF-1α ？ 血管新生 运动与粘附 基质溶解酶 NFκB AP-1 JAK MAPK … ？ 鼻咽癌侵袭和转移 + + ？ 氧内环境改变时： 研究内容 LMP-1+/-鼻咽癌细胞株条件培养时瘤细胞运动侵袭能力的检测。 NPC细胞条件培养时HIF-1α、促血管生成因子、ECM降解酶及信号转导分子的检测。 裸鼠接种观察条件培养的LMP-1阳性CNE细胞的肿瘤生长及转移情况，并作组织切片分析。 LMP-1+/- NPC细胞条件培养 Transwell实验 细胞爬片 RNA抽提 裸鼠接种 检测细胞运动侵袭 IHC/ISH VEGF/Survivin uPA/PAI, MMPs HIF-1α mRNA AP-1 mRNA NFκB mRNA Jak mRNA 观察生长与转移 组织切片 CD105 相关分析 蛋白抽提 免疫共沉淀-Western blot LMP-1/ HIF-1α RT-PCR 1.23 合 计 论文发表等 0.12 其他费用 检索、打印 0.03 资料费 裸鼠 0.30 动物费 试剂、耗品 0.78 实验材料费 *