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电动微分离技术的研究进展 　　摘 要 电动微分离技术是一门近年来快速发展的技术，主要包括毛细管电泳（Capillary electrophoresis， CE）和毛细管电色谱（Capillary electrochromatography， CEC）。该技术凭借高效、快速、环境友好等特点获得了广泛的关注。早期电动微分离技术存在重现性差、定量受限及联用检测器类型有限等缺点，发展缓慢。针对这些问题，多种形式的仪器结构改造及新型检测器的研发成为电动微分离技术的研究趋势。本文主要就近年来电动微分离技术在仪器结构改造及检测器研发方面进行了系统综述，希望能够为电动微分离技术的使用提供一定的指导。 　　关键词 电动微分离技术； 定量毛细管电泳； 加压毛细管电色谱； 综述 　　1 引 言 　　近年来，随着社会的发展和进步，食品药品质量控制及环境监控的要求不断提高，对微流试剂和低毒试剂技术来替代传统的需要消耗大量试剂的分析技术的需求更加迫切[1，2]。同时，随着生命科学在全球的兴起，样品的贵重化和微量化也显得尤为突出，现有的很多分析手段已经无法满足科技工作者对痕量样品的高效、快速的分析要求，需要具有更高分辨率、更快分离速度和更高灵敏度的分析技术及仪器[3]。因此，发展更加高效环保的微分离技术便成为大趋势[4]。电动微分离技术，如毛细管电泳（Capillary electrophoresis， CE）和毛细管电色谱（Capillary electrochromatography， CEC）技术等，引起了人们越来越多的关注[5～7]。这类技术具有高效、快速及环境友好等优势，但由于传统电动微分离技术存在重现性差、定量受限及联用检测器类型有限等缺点，它们的应用领域及应用范围受到了很大的限制。近年来，为了提高和拓展这类电动微分离技术的性能及应用范围，科研工作者投入了大量的精力对仪器结构进行了改造并开发了多种新型检测器。 　　本文将针对近年来电动微分离技术在仪器结构改造及检测器开发进行系统综述，期望能够为电动微分离技术的使用及发展提供指导。 　　2 仪器结构改进 　　传统的电动微分离仪器主要由进样装置、微流溶剂输送装置、微流控制装置、高压电源、毛细管柱、检测器等组成，各个部件均需要通过不断地优化和改进，才能使得电动微分离技术呈现出高柱效、高分辨率、高选择性及快速分离的优势。近年来，为了进一步提高微电动分离技术的稳定性、精密度、灵敏度和实用性，新型高精度定量进样装置、自动进样装置、微流控制方式以及毛细管柱控温系统的研发都获得了长足进展。 　　2.1 全自动高精度定量毛细管电泳 　　CE仅依靠电渗流（Electroosmotic flow， EOF）的驱动来进行离子型物质的分离，中性物质无法得到分离。而且传统的“蘸取式”进样方法无法进行定量分析。闫超等[8]研制了全自动高精度定量毛细管电泳仪（Quantitative capillary electrophoresis， qCE），结构如图1。该设备既能和UV联用，也能与LIF等检测器联用， 并具有如下优点：（1） 自动进样器通过10 nL的定量阀实现系统的准确定量，与液流分配系统的协作运行实现了该系统从取样、进样、冲洗管路以及毛细管预处理等过程的全面自动化。自动进样过程也极大地提高了分析时间的重现性。（2） 自主研制的柱温箱，可实现4℃～40℃范围的控温。有效降低了焦耳热的影响，改善该系统的定量重复性和分离效率。（3） 成功引入电隔离槽装置，将定量阀隔离于电场之外，提高了系统的安全性、可靠性和稳定性。并用该系统进行了胞嘧啶、脱氧尿苷、腺苷、尿嘧啶、尿苷及肌苷这6种核苷及碱基类物质的分析，保留时间的相对标准偏差（RSD）0.6%，峰面积的RSD在0.5%～3%之间，表明该系统改善了传统电泳的痼疾，定性和定量分析重复性可达到FDA的要求，分析结果准确可靠。 　　2.2 加压毛细管电色谱 　　毛细管电色谱（CEC）是依靠电渗流（Electroosmotic flow， EOF） 的推动力和两相间分配系数的不同分离极性和中性物质，但在分析过程中容易发生干柱和气泡现象。为了克服传统CEC的缺陷，引入了液相色谱溶剂输送模块，提出了加压毛细管电色谱（Pressurized capillary electrochromatography， pCEC）的概念。pCEC采用了压力流和电渗流的双驱动，柱效介于HPLC和CEC之间[9]。Yan 等推出了TriSepTM-2000系统，实现了pCEC与紫外检测器的联用，它通过两个微流泵来输送溶液并且经过混合阀混合，在毛细管色谱柱进样端提供一定的压力，二元微流泵系统可由程序来控制其中两种流动相的混合比例，完成溶剂的梯度洗脱。整个系统由于有压力和电压两个参数