8 超薄切片与薄切片.docVIP

第8讲 半薄/超薄切片技术 取材→固定→脱水→渗透→包埋→聚合→修块→切片→染色 背景： 肉眼 光学显微镜 透射电镜 分辨率 0.2mm 0.2μm 0.2nm 应用范围 可观察头发丝、双面刀刀刃的厚度 可观察细胞的结构(最大有效倍数:1000) 可观察细胞内的结构,分辨DNA、蛋白质等生物大分子、单个金属原子（放大倍数可达百万倍） 观察半薄切片 观察超薄切片 现有的透射电镜生物制品制备技术分为两类： 一类是透射电镜的基本制备技术，包括超薄切片和负染色法； 另一类是生物制品特殊技术，包括冷冻蚀刻法、冰冻割断术、电镜细胞化学术、免疫电镜术、电镜放射自显影技术、X线微区分析技术等。 基本概念 一、生物样品制备技术的重要性 1、决定电镜图像分辨率的两个因素 1）电镜本身的分辨本领 2）样品的结构和反差，而样品的结构与反差在很大程度取决于样品制备技术 2、电镜样品应具备的基本条件 1）样品必须彻底干燥； 2）样品要进行提高反差处理 2）样品要进行提高反差处理 4）样品耐受电子束的轰击 5）充分保存好生物样品的超微结构 二、TEM样品制备技术分类 1、超薄切片技术（普通） 2、冷冻超薄切片技术 3、冷冻置换和低温包埋技术 4、金属投影技术 5、表面复型技术 6、冷冻(断裂)蚀刻及复型技术 7、免疫电镜技术 8、电镜细胞化学技术 7、8、9是TEM，SEM共有