第07章 细菌和病毒的遗传.pptVIP

第七章 细菌和病毒的遗传 第一节 细菌和病毒遗传研究的意义 第二节 细菌的遗传分析 第三节 噬菌体的遗传分析 第一节 细菌和病毒遗传研究的意义 *一、细菌的生物学特征 *二、病毒的生物学特征 三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性 四、细菌和病毒的拟有性过程 五、细菌遗传的实验研究方法 一、细菌的生物学特征 二、病毒的生物学特征 病毒没有细胞结构，既不属于原核生物，也不属于真核生物。可分菌类病毒，动物病毒和植物病毒。 病毒结构十分简单，仅含一种核酸，或DNA或RNA，和一个蛋白质外壳。 蛋白质外壳保护遗传物质，并参与感染宿主细胞的过程。在病毒中没有合成蛋白质外壳所必须的核糖体。 病毒的生物学特征 病毒必须感染活细胞，改变和利用活细胞的代谢合成机器，才能合成新的病毒后代。感染细菌的病毒又叫噬菌体 bacteriophage 。 依其遗传物质的性质，可将病毒分为单链DNA、单链RNA、双链DNA和双链RNA等四种类型。依其与宿主细胞的相互关系，可以有烈性 virulent 和温和 temperate 噬菌体两大类型。 病毒的特性 三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性 了解微生物遗传研究有助于理解多年来分子生物学、分子遗传学理论发展。 世代周期短，繁殖世代所需时间短； 易于操作管理和进行化学分析 纯培养与代谢产物累积 ； 便于研究基因的突变 表现与选择 ； 便于研究基因的作用 突变型生长条件与基因作用 ； 便于研究基因的重组 重组群体大、选择方法简便有效 ； 遗传物质比较简单，可作为研究高等生物的简单模型 在研究基因结构、功能与表达调控时更为简便。 微生物的应用领域日益扩大、成就突出 微生物工程 ； 在遗传工程中，作为重要研究材料、工具，也具有决定性作用。 四、细菌和病毒的拟有性过程 真核生物基因分离、自由组合及连锁交换均通过有性过程实现。细菌和病毒均不存在严格意义上的有性过程。 细菌细胞内除了染色体外还有一些寄生性复制因子 如噬菌体和质粒 ，它们可以在细胞间传递，并且形成细菌染色体间以及细菌染色体与核外遗传因子间的重组体。 这种重组体结构类似于真核生物减数分裂过程中形成的重组体结构。 拟有性过程：引起细菌、病毒间遗传物质转移与重组的过程。 拟有性过程的存在是细菌、病毒在遗传学研究，特别是作为真核生物的模型研究遗传重组和基因结构的重要前提。 一 细胞计数 培养物细胞浓度 培养物中微生物计数方法是微生物学的基本实验技术，其基本思路是： 对原培养物进行连续稀释； 进行平板涂抹培养； 由于每个细胞形成一个菌落，计数菌落数； 根据稀释倍数计算原培养物中的细胞浓度。 二 建立纯系的方法——纯培养 挑取由单个细胞繁殖而来的菌落进行培养就可以获得由一个细胞繁殖而来的纯系。 通常采用平板表面涂布法或划线法可以获得单菌落。这种方法获得的纯系，称为“菌种纯”。 有时采用显微操纵器进行菌丝尖端切割等方法从单个细胞直接培养建立纯系。采用这种方法获得的纯系称为“菌株纯”。 三 选择培养法鉴定突变型与重组型 许多细菌的突变都与培养基营养成分及培养条件有关。 营养缺陷型的筛选、鉴定： 选择培养法是根据菌株在基本培养基和营养培养基上的生长表现将菌株分为原养型和营养缺陷型。 其它突变类型的筛选、鉴定： 对于其它的突变类型 如温度敏感型 ，也可以通过培养条件的选择培养来筛选与鉴定。 四 突变型与重组型的批量筛选方法 为高效检测、分离混和群体中不同突变型，黎德伯格夫妇设计了影印培养法。 该方法原理与选择培养法一致，但是采用影印法将在完全培养基上单菌落同时接种到不同选择培养基上同时对所有菌落进行选择培养，鉴定效率大大提高。 注意： 1 最初的培养基必须是非选择性的，即各种突变型都能够在其上生长； 2 必须采用适当的方法如涂布或划线法，以使培养物菌落之间要分开。 影印培养法 细菌基因重组的方式 第二节 细菌的遗传分析 一、转化 二、接合 三、性导 一、转化 transformation 一 、细菌转化实验 二 、转化过程 三 、共同转化与遗传图谱绘制 转化 transformation 转化 transformation 是指某些细菌 或其他生物 能通过其细胞膜摄取周围供体 donor 的染色体片段，并将此外源DNA片段通过重组整合到自己染色体组的过程。 只有当整合的DNA片段产生新的表现型时，才能测知转化的发生。转化中接受供体遗传物质的称为受体 receptor 。 大部分的转化工作是用肺炎双球菌 Streptococcus pneumoniae 、枯草杆菌 Bacillus subtilis 和流感嗜血杆菌 Hemophilus influenzae 进行的。 一 、细菌转化实验 1. 基础知识 野生型肺炎双球菌