植物病害试验与数据分析讲解.ppt

Company Logo 云南农业大学植物保护学院 王扬 第五节 线虫类试验与报告 线虫病病害概述 根结线虫土壤虫量调查方法 根结线虫病害调查方法 根结线虫病抗病性测定试验设计与数据处理 根结线虫病防治试验设计与数据处理 根结线虫病产量损失预测 线虫是一类低等无脊椎动物，部分种类能够寄生植物，造成产量损失或植物产品质量变劣，引起植物病害； 线虫对植物的危害主要有：1. 线虫口针穿刺和线虫侵入引起的机械损伤，2. 食道腺分泌物对植物的致病作用； 线虫危害的部位包括植物的根系、幼芽、茎秆、叶片、花、果实、种子等，其中绝大多数种类危害地下部，属于土传病害，几乎所有植物的根部都有线虫寄生； 线虫病害发病进程缓慢，属于积年流行性病害，地上部症状通常不明显，类似营养不良症状。 根结线虫生活史 根结线虫病是典型的积年流行性土传病害，土壤中土壤中的活跃态二龄幼虫是决定病害发生程度的重要因素； 土壤虫量调查是根结线虫病害调查的基本内容，通过初始虫量的调查可以预测病害的发生程度，通过对作物整个生长季节中虫量变化的调查可以评估作物对根结线虫的抗性以及防治措施的效果。 田间取样方法 根结线虫田间分布存在不均匀现象，因此土壤样品采集采取“Z”字型或棋盘式取样法，力求所获数据能够反映整个田块的情况。 在每个选定的取样点，用土壤取样器，取深度为0-20cm的土柱，同一田块的所有土样混合均与，合为一个样本，带回室内进行线虫分离。 活跃态土壤根结线虫二龄幼虫分离法-浅盘法 每份土样，量取100ml土壤，移入覆盖滤纸的筛网上置于浅盘中加水浸没，静止24h。浸出液先后通过200目和500目筛网，收集500目筛面上的线虫，置于显微镜下观察计数。每样品重复三次，取平均值为样品虫量。 A B C D 土壤总虫量分离计数-密度梯度离心法 量取10ml土壤样品，转入50ml离心管，加入30水悬浮土壤，4000转/min离心1min，弃上清液，沉淀中加入45%蔗糖溶液再次悬浮，2000转/min离心1min，上清液过500目筛网，筛面上收集土壤中的各虫态线虫和卵，显微镜下观察计数。每样品重复三次，平均值为样品总虫量 个体病情调查-根结指数调查 挖出完整根系，用清水洗净，估算带根结的根占整个根系的百分比。根据根结指数划分病级： 0级：无根结 1级：轻微感染，仅有少量根结，根结百分率小于5% 2级：根结明显，根结百分率小于25％ 3级：根结百分率26～50％ 4级：根结百分率51～75％ 5级：根结百分率76％以上 群体病情调查 发病率= ×100% 病情指数= ×100 发病株数 调查株数 盆栽接种测定烟草对花生根结线虫抗性 1. 供试根结线虫接种源制备 花生根结线虫（M. arenaria）采自云南牟定县，经单卵块纯化，通过种类鉴定，在感病的番茄品种Rutgers上扩大繁殖，收获病根，用次氯酸钠处理，获得卵悬浮液，显微镜下计数定量。 2. 待测烟株的接种 各个烟草品种在播种前先用2%福尔马林溶液表面播种土为腐殖土细砂按体积比1:1混匀，湿热灭菌。烟苗长至5~6片叶时，移栽试验盆中，同时接种根结线虫，盆土为腐殖土 ：沙=1:2的灭菌土。根结线虫按3000卵/盆接种，设重复4盆，同时设不接卵对照，重复4盆，随机排列，接种后常规管理，浇水，施肥，适时喷药，防止其它病虫干扰。 3. 病害调查及抗性评价 接种60天后将接种过的植株整株倒出，清水洗净根部。调查每烟株根部发病情况，根据病害症状描述，记载病情级别及单位根重的卵数，计算根结指数。平均根结指数0-1为免疫、1-2为高抗、2-3为中抗、3-4为中感、4-5为高感。 4. 数据分析 应用软件SAS进行数据分析，用Duncan’s方法对数据进行比较。 原始数据 烟草品种 根结指数 重复1 重复2 重复3 重复4 重复5 重复6 南卡58 5 5 3 5 5 4 3074 4 5 3 5 3 4 Coker48 5 4 5 4 5 4 Coker319 5 5 5 5 5 5 大黄调把 4 5 4 4 5 5 变烟 2 4 3 3 3 4 麻栗坡旱烟 4 5 5 3 5 4 处理结果 采用Duncan’s多重比较，不同小写字母的数据代表处理之间差异显著(P0.05) 烟草品种 根结指数 抗性评价 南卡58 4.5±0.7ab 高感 3074 4.1±0.8b 高感 Coker48 4.7±0.5ab