荔枝中提取多糖的工艺研究.docVIP

荔枝中提取多糖的工艺研究 　　【摘 要】 目的：以荔枝干肉为原料，采用热水浸提技术从荔枝干肉中提取水溶性多糖。方法：首先进行单因素实验，然后通过正交实验试验分析方法优化热水浸提荔枝干肉得到水溶性多糖的最佳工艺参数，最后对多糖含量进行测定 结果：热水浸提提取的最佳工艺参数为荔枝干肉与水溶剂最佳比例1：17（g/ml）、提取温度100℃、提取时间4.0h、醇沉时加入3倍体积乙醇，醇沉时间为5h。 　　【关键词】 荔枝干 多糖 水提醇沉 提取工艺参数优化 正交试验 　　1 引言 　　荔枝（litchi）是无患子科荔枝属植物，原产自中国，至今有2000多年的栽培历史。荔枝果皮色泽鲜红，肉质则洁白而晶莹，汁多而味甜，营养非常丰富，深受人们的喜爱。《本草纲目》述称：常食荔枝能补脑健身，能治疗瘰病疗肿，开胃益脾补养元气，是产妇和老弱者的良好补品[1-2]。荔枝的成分：可食用部分73%。每100g中含能量293KJ、水分81.9g、蛋白质0.9g、脂肪0.2g、膳食纤维0.5g、碳水化合物 16.lg、胡萝卜素10μg、视黄醇当量2μg、硫胺素0.1mg、核黄素 0.04mg、尼克酸1.1mg、维生素C41mg，钾151mg、钠1.7mg、钙2mg，镁12mg、铁0.4mg，锰0.09mg、锌0.17mg、铜0.16mg、磷24mg、硒0.1等[3]。荔枝果肉中含有大量的糖、维生素c，磷、钙，以及少量蛋白质、脂肪、铁、维生素B等人体必需的营养物质，味道甜美可口，是难得的滋补佳品。研究显示，荔枝多糖在抗活性氧、抗衰方面具有较强的作用[4]。果皮中还存在着一些具有很强抗氧化作用的酚酸、黄酮类物质，这些物质可用于制药或制保健食品的功能性辅料[5]。荔枝核种子中含有1.12%的皂甙，3.43%的蒜质，9.74%的还原糖淀粉及12.5%的总糖，此外还有脂肪酸仁，氨基酸仁及聚合花色素成分[6]。不同品种的荔枝果肉中多糖含量有一定差异，多糖含量由高到低依次是：桂味黑叶妃子笑糯米糠槐枝白蜡[7]。荔枝果实的糖/酸比较高，存在品种差异，妃子笑为65.7，糯米糍高达92.3[8]。 　　多糖又称多聚糖（Polysaccharide），它是由10个以上单糖通过糖苷键连接成的聚糖，分子量一般为数万甚至达数百万。多糖作为构成生命的四大基本物质之一，它来自于高等植物、动物细胞膜以及微生物细胞壁中的天然高分子化合物[9]。现在国际上多糖研究以日本、美国、德国和加拿大处于领先地位，我国多糖的研究虽然起步较晚，自80年代以后各地纷纷掀起研究热潮。药理和临床研究证明，某些多糖具有增强免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化、抗衰老、降血脂等多种生理活性[10-12]。 　　对多糖提取研究正日益引起人们的关注，因此在荔枝中提取多糖的工艺研究有了重要的意义。本实验采用水提醇沉法提取荔枝多糖。目前，这也是在植物活性多糖提取中应用最多的方法。多糖常与其它分子共存于植物中，可利用多糖不溶于有机溶剂的性质在提取液中加入乙醇等使多糖从提取液中沉淀出来，达到初步分离纯化的目的。本文研究了对荔枝多糖提取工艺。选用廉价且无毒副作用的水作溶剂，对荔枝多糖提取条件进行优化，从而以最大限度提高荔枝多糖的提取率，从而为荔枝多糖产品的规模化生产与应用奠定理论和实验基础，也为开发高档次、附加值高的各种食品和营养保健品提供参考。 　　2 材料与方法 　　2.1 试剂及仪器 　　荔枝干（糯米糍）当地市场购买；葡萄糖（分析纯）；苯酚（分析纯）；浓硫酸（分析纯）；无水乙醇（分析纯）；氯仿（分析纯）；正丁醇（分析纯）；丙酮（分析纯）；木瓜蛋白酶（酶活力≥6000U/mg）；透析袋：截留分子量14000；T200型电子天平；数显电子恒温水浴锅；KA-1000型离心机；721可见分光光度计；CS101-1C电热鼓风干燥箱。 　　2.2 实验方法 　　2.2.1 葡萄糖标准曲线的绘制[13-14] 　　采用分光光度法测定荔枝多糖的浓度，其原理是：多糖类成分在浓硫酸作用下，先水解成单糖，然后迅速脱水成糖醛衍生物，最后与苯酚缩合成有色化合物，该产物在490nm处有强吸收峰。 　　精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品20mg，置于500mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释至刻度，配成0.04mg/mL的标准溶液。然后精密移取标准溶液0.4mL，0.6mL，0.8mL，1.0mL，1.2mL， 1.4mL，1.6mL，1.8mL，置于具塞试管中，各以蒸馏水补充至 2.0mL，然后加入6%苯酚1.0mL及浓硫酸5.0mL，静止l0min，摇匀，室温放置20min后于490nm测吸光度，以2.0mL水按同样显色操作作为空白，以吸光度（A）对葡萄糖浓度（C）做回归处理，得回归方程：y=0.0539x-0.02