第2节基因工程的基本操作程序导学案.docVIP

专题1 基因工程 第2节 基因工程的基本操作程序导学案 【学习目标】： 1．掌握基因工程基本操作程序的四个步骤 2．掌握目的基因的获得、基因表达载体的构建、目的基因的导入与检测等常用的方法及其基本原理 【学习重点】：基因工程基本操作程序的四个步骤 【学习难点】：（1）从基因文库中获取目的基因 （2）利用PCR技术扩增目的基因 【学习过程】：用心积累，整体感知。细心品读，深化感知。熟练运用，巩固感知。 预则立、不预则废（仔细阅读教材，根据导学案上的知识链条，完成下面的内容） 基因工程的基本操作程序 基因工程的基本操作程序包括哪几个步骤？ 目的基因的获取 目的基因主要是指 获取目的基因的方法 基因文库的概念和分类 PCR的概念 基因表达载体的构建 目的： 组成： 各部分作用 启动子： 终止子： 标记基因： 将目的基因导入受体细胞 转化的概念： ! 将基因导入植物细胞的方法： 2 将基因导入动物细胞的方法： 3 将基因导入微生物细胞的方法： ①原核生物作为基因工程受体细胞的优点： 。 ②大肠杆菌细胞最常用的方法： a．用 处理细胞，使细胞处于一种 的生理状态，这种细胞称为 细胞； b．将 分子溶于缓冲液与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。 目的基因的检测与鉴定 检测方法有哪些？ 鉴定方法 合作探究、展示自我 利用参考书，完成下列问题 1.基因文库的建构方法有哪三种？ 2.讲解三种方法的大致过程 3.讲解基因表达载体的构建过程 1 、用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。 2 、用_____________切断目的基因，使其产生_________________。 3 、将切下的目的基因片段插入质粒的______处，再加入适量_____________，形成了一个重组DNA分子（重组质粒） 4.介绍农杆菌转化法的原理和适用范围 目的基因的检测与鉴定（为什么要检测和鉴定？） 目的基因的检测与鉴定可以从什么水平来做？ DNA分子杂交技术基本过程是？ 什么是探针？ 如何检测目的基因是否转录出mRNA（目的基因是否发挥功能）？ 如何检测目的基因是否翻译出蛋白质？ 如何从个体生物学水平鉴定转基因抗虫棉？ 三、课堂检测 1.下列有关基因工程技术的正确叙述是 A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 2.科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子（抗虫基因首端），导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子（抗虫基因末端），导入棉花受精卵，结果长成的植株有了抗虫能力。由以上过程推知，作为目的基因的运载体应具备的结构是（　　） A.目的基因、启动子 B.目的基因、终止子 C.目的基因、启动子、终止子 D.目的基因、启动子、终止子、标记基因 3.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是（　　） ①检测受体细胞是否有目的基因　②检测受体细胞是否有致病基因　③检测目的基因是否转录mRNA　④检测目的基因是否翻译蛋白质 A.①②③　B.②③④　C.①③④　D.①②④ 4.下列不属于获得目的基因的方法的是 （ ） A．利用DNA连接酶复制目的基因 B．利用DNA聚合酶复制目的基因 C．从基因文库中获取目的基因 D．利用PCR技术扩增目的基因 5.下列哪项不是基因表达载体的组成成分 （ ） A．启动子 B．终止密码子 C．标记基因 D．复制原点 6.在基因表达载体的构建中，所需要的酶是 （ ） ①限制酶 ②DNA连接酶 ③解旋酶 ④DNA聚合酶 A．①② B．①②③ C．①②④ D．①②③④ 7.将目的基因导入微生物细胞之前，要用Ca2+处理细胞，处理过的细胞叫（ ） A．感受态细胞 B．敏感性细胞 C．吸收性细胞 D．接受细胞 11.农杆菌转化法转移目的基因进入受体细胞，目的基因的最终位置是 （ ） A．Ti质粒上 B．受体细胞染色体上 C．裸露细胞核中 D．存在细胞质中 8.目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是检测受体细胞是否有目的基因? 检测受