实验一可溶性还原性糖、脂肪和蛋白质的检测详解.ppt

实验一 可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 一、实验原理 可溶性还原糖 ＋ 二、几种重要的试剂 斐林试剂 三、实验材料 还原糖鉴定：浅色、白色且富含还原糖的材料，如苹果、梨、白萝卜的匀浆 （西瓜汁、甘蔗不符合） 蛋白质鉴定：稀释蛋清液、牛奶、豆浆等 脂肪鉴定：花生子叶徒手切片 四、实验方法与步骤 1、可溶性还原糖的鉴定 2、脂肪的鉴定 五、注意事项 良好的实验材料是实验成功的一半 斐林试剂和双缩脲试剂的配制、使用方法和用途。 脂肪的鉴定，把化学反应和显微镜观察结合起来，也称为显微化学反应。 * * 蛋白质 ＋ 脂肪 ＋ 斐林试剂 双缩脲试剂 砖红色沉淀 苏丹Ⅲ染液 苏丹Ⅳ染液 橘黄色 红色 紫色 颜色反应 水浴加热 可溶性还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖 （蔗糖、淀粉都没有还原性） 甲液（0.1g/mL的NaOH溶液） 乙液（ 0.05g/mL的CuSO4溶液） 现配现用 等量 混合均匀 双缩脲 试剂 A液（0.1g/mL的NaOH溶液） B液（ 0.01g/mL的CuSO4溶液） 现配现用 先加A液 再加B液 (1)制备组织样液：苹果洗净、去皮、切块→取5g加少许石英砂研磨→加5mL水再研磨→漏斗垫纱布后过滤，得到样液 (2)鉴定样液：取2mL样液于试管中→注入 2mL刚配制的斐林试剂，振荡混合（淡蓝色）→ 水浴煮沸2min左右，观察溶液颜色变化（先变为棕色，再变为砖红色） (1)切片制作 (2)染色：在花生子叶切片上滴2～3滴苏丹Ⅲ染液→2～3min中后，吸去染液→ 滴体积分数为50％的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精，再滴1～2滴蒸馏水，盖上盖玻片 (3)镜检鉴定：在低倍物镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处，移至视野中央→转动转换器，换用高倍物镜观察（脂肪滴:橘黄色的圆形小颗粒） 3、蛋白质的鉴定 (1)制备组织样液：浸泡黄豆1～2d→去皮、切成薄片，加少许石英砂及5mL水研磨→漏斗垫纱布后过滤，得到样液（用蛋清要稀释10倍以上，否则实验后黏住试管壁不易洗净） (2)鉴定样液：取2mL样液于试管Ⅰ中→加入 2mL双缩脲试剂A液摇匀（造成一个碱性环境）→ 加入双缩脲试剂B液3～4滴，摇匀，注意颜色变化（溶液变为紫色）。 *