2―氨基―4，6―二甲氧基嘧啶的液相色谱分析.docVIP

2―氨基―4，6―二甲氧基嘧啶的液相色谱分析 　　摘要：建立高效液相色谱法测定农药中间体的方法，采用外标法定量分析2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶，流动相采用甲醇与水体积比7∶3配制，流速为1.0 mL/min，检测波长为254 nm，进样量为20 μm，灵敏度为0.08 AUFS，柱温为室温。测定结果表明，平均回收率为99.5%，标准偏差为0.213，变异系数为0.205%，线性相关系数为0.999 6。测定方法简便、可靠，可用于产品的含量分析。 　　关键词：2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶；高效液相色谱；外标法定量分析 　　中图分类号：O657.7+2；TQ457.2+3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）11-2885-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.044 　　磺酰脲类除草剂能够抑制多数种类的杂草，具有高活性、高选择性、高安全性（对人畜毒性低）等特点，应用前景广阔[1-3]。2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶（2-amino-4，6-dimethoxypyrimidine，C6H9N3O2）是一种重要的农药和医药中间体，应用广泛，通常用于合成磺酰脲类农药等除草剂[4]。2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的快速、简便检测指标，如水分和干燥失重等，是该产品质量控制的重要内容，受到研究者重视。吴培等[5]利用毛细管气相色谱分析法，在2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶样品中加入已知量的标样，测得2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的回收率为99.5%。高效液相色谱分析法是应用最普遍的一种分析方法[6]，本研究使用高效液相色谱法对2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶进行分析研究，以探究适用的分析方法。 　　1 材料与方法 　　1.1 试剂与仪器 　　主要试剂：甲醇（Sinopharm Chemical Reagent Co），无水甲醇（天津市嘉宇精细化工有限公司）均为AR；卡尔费休试剂3-5（安全型无吡啶，上海新中化学科技公司）。 　　主要仪器：KF-1B水份测定仪（CHI660B，上海辰华仪器公司）；电子分析天平（FA2004B，上海化工研究院仪表厂）；超声波清洗器（KQ3200E型，昆山市超声仪器有限公司）；电热鼓风干燥箱（9070（A），上海一恒科学仪器有限公司）；岛津高效液相色谱仪（Shimadzu LC-10AT，岛津制作所）。 　　试验在室温下进行（约15 ℃），所用水为蒸馏水。 　　1.2 色谱试验条件 　　流动相为甲醇∶水=70∶30（V/V），将抽滤过的甲醇和水混合用超声波排气，色谱柱为Shimaudzu Shim-pack vp-ODS（250 mm×4.6 mm，5 μm），流速为1.0 mL/min，检测波长为254 nm，进样量为20 μm，灵敏度为0.08 AUFS，柱温为室温。 　　1.3 试验方法 　　采用标准曲线法来测定2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的含量。分别称取0.04、0.06、0.08、0.12、0.16 g共5组样品加入5个50 mL的容量瓶中，分别加入40 mL溶剂，超声溶样10 min，定容50 mL，摇匀，用移液管移取5 mL至另一50 mL容量瓶中定容、摇匀，待用。进样前，将样品溶液过滤，进样时用100 μm的进样器抽取80 μm（注意赶气泡），每个样品进2个平行样，两次进样峰面积平均误差不能超过1%[计算公式为（A1-A2）/（A1+A2）]。否则需要重复进样，直到两次进样峰面积平均误差不超过1%。 　　采用卡尔费休水分滴定仪测定水分。尔费休水分滴定仪测定水分操作简单、应用广泛、自动化程度高，结果可靠准确[20]。对编号为A、B、C的3批产品分别进行多组平行样的测定。 　　烘箱干燥法测定干燥失重。干燥失重[21]是评价2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶质量的重要指标之一，采用烘箱干燥法测定，干燥温度设定为50 ℃，干燥时间为45 min。 　　2 结果与分析 　　2.1 高效液相色谱测定2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的含量 　　2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶的测定数据及浓度的计算结果见表1和图1。由表1和图1可知，标样的浓度与峰面积呈正比。当称样量增大时，浓度增大，其峰面积增大。由多组数据得到峰面积（x）与浓度（y）的关系，y=0.131 5x-0.09 7，R2=0.099 1。 　　以2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶在0.040 0～0.140 0 g范围内配制溶液，在相同色谱条件下测定，以2-氨基-4，6-二甲氧基嘧啶对内标物的质量为纵坐标，对应的峰面积为横坐标绘制线性关系曲线图，得到线性关系方程为y=0.100 0x-0.009 7，R2=0.999 1。 　　选取1个