15分光光度.pptVIP

二、化学因素 1、吸光质点的相互作用，浓度较大时，产生负偏差， 朗伯-比尔定律只适合于稀溶液（c 10-2 mol·L-1 。 2、平衡效应，物质的离解、缔合、互变异构及化学变化引起的偏离，如： Fe SCN 3 Fe3+ + 3SCN- Cr2O72- + H2O 2CrO42- + 2H+ 15.3 分光光度计及主要部件 1光源：应有足够的发射强度而且稳定,如钨丝灯 2单色器：采用棱镜或光栅获得单色光。 3吸收池：比色皿，厚度有0.5、1、2、3cm等。 4检测器：光电池或光电管。 光源 单色器 检测系统 吸收池 动画 722型光栅分光光度计结构示意图 分光光度计的分类以及721 / 722型分光光度计的使用方法见实验教材。 722型光栅分光光度计外形示意图 15.4 显色反应和显色条件的选择 显色反应和显色剂 在分光光度分析中，利用显色反应把待测组分X 转变为有色化合物，然后再进行测定。 使试样中的被测组分与化学试剂作用生成有色化合物的反应叫显色反应。 mX 待测物 ＋nR 显色剂 ＝XmRn 有色化合物 显色反应主要有配位反应和氧化还原反应，其中绝大多数是配位反应。 15.4.1 对显色反应的要求 1、灵敏度高，选择? 较大的显色反应。避免共存组分干扰。 2、选择性好，显色剂只与被测组分反应。 3、有色物组成固定，如： Fe3+ + 磺基水杨酸 → 三磺基水杨酸铁 黄色 （组成固定） Fe3+ + SCN - → FeSCN2+、 Fe SCN 2 + …… （组成不固定） 4、有色物稳定性高，其它离子干扰才小。如三磺基水杨酸铁的Kf 1042 , F- 、H3PO4 对它无干扰。 5、显色过程易于控制，而且有色化合物与显色剂之间的颜色差别应尽可能大。 15.4.2 显色反应条件的选择 1、显色剂用量 ，适当过量。适宜的用量通过实验求得 c R A c R A c R A 在pH＝2～3 Fe ssal + 在pH＝4～7 Fe ssal 22- 在pH＝8～10 Fe ssal 3 在pH 12 Fe OH 3 棕橙色 沉淀 黄色 紫红色 2、溶液酸度，既要防止被测离子生成沉淀，又需防止有色配合物离解。有效的方法是加入缓冲溶液（考虑干扰） 5、溶剂，有机溶剂会降低有色物的离解度，从而提高 显色反应的灵敏度。 6、共存干扰离子的影响及消除 1 控制酸度，使干扰离子不显色。 3、温度，通过实验找出适宜的温度范围。 4、时间，在颜色稳定的时间范围内进行比色测定。 3 改变干扰离子价态，测Ni2+时，Fe2+ 有干扰，加入氧化剂， Fe2+ → Fe3+ . 4 分离干扰离子，用萃取、沉淀、电解、离子交换等方法。 还可选择适当的参比溶液和入射光的波长等方法来消除共存离子的干扰。 2 加入掩蔽剂 ，如用SCN-测定Co2+时，Fe3+有干扰，加入 F- ，Fe3+ + 6F- FeF63- ， Fe3+ 被掩蔽。 离子交换法用于Fe3+、Al3+分离时．先用HCl溶液处理试液，使铁、铝分别以FeCl63-、Al3+形态存在。然后经过阳离子树脂交换柱，此时Al3+留在柱上，而FeCl63-流出柱子，从而达到分离的目的。 色谱分离法，若在充填硅胶、活性氧化铝、纤维素等载体的柱子上进行，则称为柱上色谱分离法；若用滤纸作载体，则称为纸上色谱分离法。 溶剂化合物萃取体系，例如磷酸三丁酯萃取FeCl3。 某些无机化合物萃取体系，例如CCl4萃取I2。 15.4.3 分光光度法常用的显色剂 （一）、无机显色剂 钼酸铵法 测 P、 Si、W ， 过氧化氢法 测V5＋、Ti4＋ （二）有机显色剂（主要使用） 1、O，O给电子螯合剂： 铬天菁S（CAS）、苯基荧光酮（ PF ） 2、O，N给电子螯合剂：偶氮胂III等 3、N，N给电子基团：邻二氮杂菲（测Fe）等 4、带含硫基团的螯合剂：双硫腙（测Cu、Pb、Zn、Cd、Hg等） 15.5 测定条件的选择 15.5.1、选择合适波长的入射光。p268（?最大，3点） （545nm） 原则：使溶液的吸光度能真正反映待测物的浓度。 在吸光度测量中，作为比较的溶液或溶剂称为参比溶液或空白溶液。 15.5.2选择适当的参比溶液。 1 试样、试剂、显色剂都无色时，用纯水作参比。 2 试样无色，试剂、显色剂有色，采用不加试样的空白溶液作参比。√（试剂空白） 3 试样有吸收，而显色剂等无色，可采用不加显色剂的试样为参比。（试样空白） 4 均有色，有吸收，对试样加入掩蔽剂，褪色后再加显色剂等作为参比。 褪色空白 15.5.3 吸光度读数范围的选择 透光率读数的准确度是仪器