分析化学--平面色谱法讲解.pptVIP

第十九章 平面色谱法 第一节　平面色谱法的分类和原理 分类 　　薄层色谱法： 吸附薄层色谱法 分配薄层色谱法 分子排阻薄层色谱法 　　纸色谱法:分配 　　薄层电泳法 平面色谱法参数 定性参数 相平衡参数 面效参数 分离参数 纸层析 L0 定性参数 1. 比移值Rf 讨论 Rf与K有关，即与组分性质（溶解度）以及薄层板和展开剂的性质有关 色谱条件一定，Rf只与组分性质有关，是薄层色谱基本定性参数，说明组分的色谱保留行为 1）K↑大，Rf↓小 2）薄层板一定，对于极性组分 展开剂极性↑大，Rf↑大（容易洗脱） 展开剂极性↓小，Rf↓小 （不容易洗脱） 3）Rf范围：0 Rf 1 （组分迁移速度和距离小于展开剂迁移速度和距离） Rf = 0.2——0.8（常用） 0.3——0.5（最佳） 2. 相对比移值Rs 讨论 参考物与被测组分在完全相同条件下展开 可以消除系统误差，大大提高重现性和可靠性； 参考物可以是后加入纯物质，也可是样品中已知组分 相对比移值Rs与组分、参考物性质及色谱条件有关，范围可以大于或小于1 相平衡参数 分配系数K= Cs/Cm 容量因子 k= CsVs/CmVm K、k与Rf值的关系： 　　　　　 相平衡参数 K、k与Rf值关系推导： (与定距展开比较) Rf =L/L0=u/u0=R’= R’为保留比 面效参数 1、理论塔板数 n=16(L/W)2 L:原点到斑点中心的距离 W：组分斑点的纵向宽度 2、塔板高度 H=L0/n L0：原点到展开剂前沿的距离 n越大，H越小。 分离参数 1、分离度(resolution; R) 两相邻斑点中心的距离与两斑点平均宽度的比值 R=2(L2-L1)/(W1+W2)=2d/(W1+W2) L为原点至两半斑点中心的距离， W为斑点的宽度。 第二节 薄层色谱法 1．定义：将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上， 形成薄层而进行色谱分离和分析的方法 2．操作过程： 铺板 →活化 →点样 → 展开 →定位(定性)/洗脱(定量) 3．分离机制：吸附（分配，离子交换，空间排阻） 4．特点：分析快速、灵敏、显色方便 5．应用：药物杂质检查、纯度测定 (一)吸附色谱 (二)分配色谱 1. 硅胶（SiO2·H2O） 结构：内部——硅氧交联结构→多孔结构 表面——有硅醇基→氢键作用→吸附活性中心 特性： 1）与极性物质或不饱和化合物形成氢键 物质极性↑，吸附能力↑→强极性吸附中心，不易洗脱 吸附活性次序：活泼型束缚型游离型 2）吸水→失活 →105～110 ℃烘干30分钟(可逆失水)→吸附力最大 →500℃烘干(不可逆失水)→活性丧失，无吸附力 2. 氧化铝 碱性氧化铝 pH 9～10 适于分析碱性、中性物质 中性氧化铝 pH＞7.5 适于分析酸性碱性和中性物质 酸性氧化铝 pH 4～5 适于分析酸性、中性物质 3. 聚酰胺 氢键作用 氢键能力↑强，组分越后出柱 吸附剂和流动相的选择： 依据被测组分、吸附剂和流动相的性质 1. 被测组分性质（极性大小）： 烃＜ - - - - - - - - ＜羧酸，醇 2. 吸附剂的活性： 吸附剂的活性↑大，对被测组分的吸附能力↑强 强极性物质——选择弱吸附剂 弱极性物质——选择强吸附剂 3. 流动相的极性： 流动相极性↑大，对被测组分的洗脱能力↑大 “相似相溶”原则 ：根据组分性质、吸附剂的活性，选择适当极性的流动相 4. 三者关系图示： 组分 吸附剂 流动相 极性 活性小 极性 非(弱)极性 活性大 非极性或弱极性 （三）吸附剂的选择 根据被测物极性和吸附剂的吸附能力 被测物极性强——弱极性吸附剂 被测物极性弱——强极性吸附剂 （四）展开剂的选择（同液固吸附色谱流动相的选择） 根据被测组分、吸附剂和展开剂本身的极性