侧柏树叶治疗冻疮的实验研究——薛梅梅讲解.doc

?编 号： 福 建 中 医 药 大 学 学 生 科 研 课 题 申 请 书 课 题 名 称： 侧柏树叶治疗冻疮的实验研究 课 题负责人： 薛梅梅 所 在 班 级：中西医结合学院2008级临床医学乙班 起 止 年 限： 2010年9月至2011年6月 申 请 日 期： 2010年10月 共青团福建中医药大学委员会 制 一、主要研究内容（研究目的、意义、技术经济价值）： 1、研究目的冻疮是由于患者的皮肤耐寒性差，加上寒冷的侵袭，导致局部血液循环障碍，使氧和营养不足而发生的组织损伤。中医学则认为本病的发生是因为患者本身阳气不足，外感寒湿之邪，使气血运行不畅，瘀血阻滞而发病。柏树叶有祛风解毒，活血生肌，润皮肤的作用，是治疗痈疽疮疡和祛风除痹的良药，民间有用其直接捣烂涂于患处治疗冻疮的土方。现拟动物实验验证柏树叶治疗冻疮的疗效，并进一步发现其有效成分。研究意义冻疮是寒冬或初春季节时由寒冷引起的局限性皮肤炎症损害，好发于人体四肢末端、面、耳等部。据统计，我国每年大约有两亿人受到冻疮的困扰，患病群体主要为儿童、妇女及老年人。冻疮一旦发生，在寒冷的季节里常较难快速治愈，轻者患处瘙痒难耐，重者患处疼痛溃烂，严重影响人的正常生活、工作。现在药品市场上主要的冻疮膏如冻疮神膏、黑玉康肤膏、冻疮宝等，都未发现有添加柏树叶的成分，只要能够提取其有效成分，就能用来研究新药，从而更好地解除广大冻疮患者的痛苦，为医药事业贡献力量。研究技术经济价值柏树为常绿乔木，在中国分布极广，北起内蒙古、吉林，南至广东及广西北部，人工栽培范围几遍全国，用其叶子做为药材取材方便，有很高的经济价值。 ?国内外现状、水平： 侧柏叶又名柏叶、丛柏叶、扁柏、云片柏等，是柏科植物侧柏 Platycladus orientalis 的干燥嫩枝叶。中医认为侧柏叶气清香，味苦涩、微辛，具有凉血止血、祛风降湿、化痰止咳、消肿散毒的功效，在临床上常用于治疗出血症、风湿痹痛、高血压、咳喘烫伤等症。明代李时珍《本草纲目》中“乃多寿之木，所以可以入服食。道家以之点汤常饮”的记载，并总结了历代医学家对侧柏叶的功效记述，能主治“吐血衄血，痢血，崩中，赤白，轻身益气，令人耐寒暑，去湿痹，生肌。治冷风历节疼痛，止尿血。炙，詈冻疮。烧取汁涂头，黑润鬓发。敷烫火伤，止痛灭瘢。服之，疗蛊痢。作汤常服，杀五脏虫，益人。”为侧柏叶的食疗养生价值做出了权威性的概括。现代研究发现该科植物主要化学成分为挥发油、黄酮类化合物、萜烯类和酚类化合物、有机酸、多糖、木脂素、鞣质、树脂、无机元素等,具有止血、镇咳祛痰、扩张支气管、抑菌、抗肿瘤、抗氧化等多种药理作用。 药理研究 1、止血作用 夏斯俊等[1]进行侧柏叶水煎剂与止血敏对小鼠凝血时间的对比实验,结果显示侧柏叶水煎剂与止血敏均可显著缩短小鼠凝血时间 P 0.01 ,且二药之间无显著性差异 P 0.05 。侧柏叶水煎剂常用剂量为10～15g,可治疗各种出血病证,且无明显毒副作用。赵钦祥等[2]做动物止血实验结果表明:小白鼠给药前后凝血时间自身相比,生侧柏叶无显著性差异 P 0.05 ,两种炭制品均有极显著性差异 P 0.01 。由此初步证明,侧柏叶炒炭口服给药可加强其止血作用。 抗炎作用 梁统等[3]探讨侧柏叶醇提取物的抗炎机理,其方法是以大鼠胸腔白细胞及兔血小板为材料,用高效液相色谱法测定细胞白三烯、12羟十七碳三烯酸及12羟廿碳四烯酸的生成。结果发现:侧柏叶醇提取物对白细胞内白三烯B4及5羟廿碳四烯酸的生物合成有较强的抑制作用,其IC50值分别为含生药0.4mg/mL及生药0.41mg/mL。侧柏叶醇提取物还可显著抑制血小板12羟十七碳三烯酸的生物合成。结论是:侧柏叶醇提取物中含有较强的抗炎成分,其作用机制与抑制花生四烯酸的代谢有关。 抗肿瘤活性 蒋继宏等[4]用Alamarblue法对提取的侧柏叶、种皮及种子挥发油进行了抗人肺癌细胞实验,结果表明侧柏叶、种皮和种子挥发油对肺癌细胞NCI H460有较高的抑制率,分别为86.24%、47.80%与97.73%,其中以叶挥发油和种子挥发油最高。其中,对侧柏叶挥发油4℃低温下重结晶得到的雪松醇进行了鉴定,纯度达97.06%,对雪松醇抗人肺癌细胞实验结果发现雪松醇对人肺癌细胞NCI H460半致死浓度为44.98μg/mL。 抗红细胞氧化作用 丁航等发现从侧柏叶中提取的黄酮加入到红细胞悬液中可明显抑制H2O2诱发的人RBC溶血，溶血度及丙二醛的含量均下降，并随着黄酮剂量的增加，抑制作用加强，为临床应用侧柏叶防RBC氧化损伤溶血性疾病提供了实验依据。 抑菌作用 公衍玲等［5］采用细菌培养实验，把侧柏叶挥发油加入到分别含大肠杆菌、枯草杆菌、四联球菌、产气杆菌和金黄色葡萄球菌的平板中，观察并测量抑菌圈