总胆红素(TBIL)测定及日照对胆红素的影响课件.pptVIP

总胆红素（TBIL）测及日照对胆红素测定的影响 吴民泸 2014.10.29 总胆红素（TBIL）测定及日照对胆红素测定的影响 一、原理 二、实验步骤 三、计算 四、参考值 五、临床意义 六、方法学评价 七、注意事项 一、原理 总胆红素（即非结合胆红素与结合红素）在二甲基亚砜、咖啡因-苯甲酸钠-醋酸钠等加速基作用下在酸性溶液中与重氮苯磺酸作用生成紫色的偶氮胆红素，与经过同样处理的校准液比较，即可计算出样品中总胆红素的含量。 二、测定步骤 试 剂 （U） （Ub） （U照） （Ub照） 样 品（ml） 0.20 0.20 — — 日照样品 — — 0.20 0.20 工作液（ml） 3.0 — 3.0 — 试剂R1 (ml) — 3.0 — 3.0 各管混匀， 置37℃恒温5分钟，560nm波长，以工作液调零，测定各管吸光度值。 测得偶氮胆红素摩尔吸光系数为74290（波长=560nm，样本/试剂=1/15），其相应的F值为215。经严格检定标化的仪器，可按以下公式计算结果。 三、计算 因数法： 样品TBil含量（μmol/L）= (Au－Aub)×215 四、参考值 5.1~17.1μmol/L 五、临床意义 ㈠血清总胆红素测定的意义 胆红素(Bil)仍是目前肝功能检查中不可缺少的项目。它是肝脏疾病、肝内或肝外胆管阻塞性疾病和溶血性疾病早期诊断的最重要指标，而且对这些疾病病情的发展和预后判断也有很重要的临床意义。胆红素，分为非结合胆红素与结合红素，分别从大、小便中排出。正常时血液中只含有微量的胆红素。 1.有无黄疸及黄疸程度的鉴别。 2.肝细胞损害程度和预后的判断：胆红素浓度明显升高反映有严重的肝细胞损害。但某些疾病如胆汁淤积型肝炎时，尽管肝细胞受累较轻，血清胆红素却可升高。  3.新生儿溶血症：血清胆红素有助于了解疾病严重程度。 4.再生障碍性贫血及数种继发性贫血（主要见于癌或慢性肾炎引起），血清总胆红素减少。㈡胆红素升高的意义 1.可以判断黄疸程度，黄疸程度与血总胆红素及血清胆红浓度(微摩尔/升)的关系：　　　　 隐性黄疸 17～34　　轻度黄疸 34～170　　中度黄疸 170～340　　重度黄疸 340　 2.依此判断黄疸类型　　黄疸类型 血清胆红浓度(微摩尔/升)　　完全阻塞性黄疸 340～510　　不完全阻塞性黄疸 170～265　　肝细胞性黄疸 170～200　　溶血性黄疸 85 3.按照胆红素分类，判断黄疸性质  ①阻塞性黄疸。当患有阻塞性胆道疾病如胆道肿瘤、胆结石、胆道蛔虫症、肝毛细胆管炎时，由于胆汁进入肠腔的通道被阻断，胆红素无法正常排泄而逆流入血引起血清总胆红素增高，结合胆红素增高，尿胆红素阳性。　　②肝细胞性黄疸。如病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝硬化、钩端螺旋体病患者，因肝脏不能将全部结合胆红素排至胆汁，故有一部分进入血液，也可使血清总胆红素增高，结合胆红素增高，尿胆红素阳性。 ③溶血性疾病。如误输异型血、疟疾、蚕豆病(一种溶血性疾病)等疾病，因红细胞破坏过多，所产生的非结合胆红素超过了肝脏处理的能力，最终引起血清总胆红素增高，非结合胆红素增高，尿胆红素阴性。 六、方法学评价 1.线性范围：0.0 ~ 342微摩尔/L 2.精密度：批内CV≤3.8%、批间相对极差≤5.8% 3.准确度:不准确度≤1.0% 4.空白吸光度：空白管在560nm波长处，10mm光径下，以蒸馏水调零，吸光度值≤0.150。 七、注意事项 1.如果样品中TBil含量超过342.0微摩尔/L，则用蒸馏水稀释后测定， 2.肝素抗凝血浆不适用于本法。 3.校准液和标本均应注意避光 4.避免试剂污染。 小结 1.实验结果与日照的关系 2.讨论分析要求 3.下次课预习 谢谢！