EBV抗体酶联免疫诊断试剂课件.pptVIP

EB病毒IgA抗体酶联免疫吸附法诊断试剂盒（受理号：X0407269 ） 中山大学中山医学院 朱振宇教授、医学博士、博士生导师 中山大学达安基因股份首席科学家 一、鼻咽癌与EB病毒感染的关系 ◆鼻咽癌（NPC）是来源于鼻咽粘膜上皮细胞的低分化或未分化癌。本病可见于世界各地，但NPC有明显的种族倾向，大部分患者是中国人及其后裔，在爱斯基摩人、北非洲人和马来人中也较常见。 ◆ 病人的肿瘤细胞中有规律地隐匿着潜伏状态的EB病毒（Epstein-Barr Virus，EBV）。 1、病人的肿瘤细胞中隐匿着EB病毒 ◆ 发现 EB病毒是1964年Epstein与Barr在非洲儿童恶性淋巴瘤的瘤细胞中观察到的一种疱疹病毒。 1966年Old等采用免疫扩散法发现鼻咽癌病人的血清能与非洲儿童淋巴细胞的抽提液起反应。 1、病人的肿瘤细胞中隐匿着EB病毒 ◆ 证据（1）： 1969年de-the从鼻咽癌活检培养的类淋巴细胞中分离出EB病毒。 国内也已经从鼻咽癌组织培养所建立的类淋巴母细胞株中证明带有EB病毒壳抗原（VCA）和早期抗原（EA），并在电镜下找到了典型的疱疹病毒颗粒，其形态与EB病毒相同。 1、病人的肿瘤细胞中隐匿着EB病毒 ◆ 证据（2）： Kottaridis SD等（1996年）认为鼻咽癌患者血清中抗EBNA的水平反映肿瘤的大小 。[Anticancer Res,1996,16 2 :785-789] Vera-Sempere FJ等（1996年）采用巢式PCR和免疫组化分析说明了不论组织学类型，鼻咽癌中均有EB病毒感染。 [Eur J Cancer B Oral Oncol,1996,32B 3 :163-168] 2、几乎100%鼻咽非角化性癌均有EBV感染。 在我国，几乎所有四岁以上的人群均已感染过EBV，80%以上的健康成人是EBV携带者。特别在珠江三角洲及香港地区，是世界上NPC的高发区。 根据中山市的肿瘤统计资料（流行病学 ），NPC的年龄和性别的校正发病率为18.12/10万 男：25.60 /10万；女：11.05/10万 。97%的NPC为非角化性癌。经EBER1原位杂交（所谓“金标准” ）证实癌细胞中有EBV感染。 EBERs原位杂交 3、NPC病人血清中的EBV抗体水平普遍升高 ◆ NPC的显著特征是病人血清中对EB病毒各种抗原的抗体（尤其是IgA亚型）水平普遍升高，借此可区分NPC与健康携带者。（ Werner Henle et al., 1976. ） ◆中国医学科学院等单位采用间接免疫荧光法，发现鼻咽癌患者血清中IgA/VCA的阳性率为90.14％，几何平均滴度为1:15.3,而其它癌瘤和健康携带者血清中IgA/VCA的阳性率为2.61%-3.30% ，几何平均滴度为1:1.3。同时还发现鼻咽癌病人放疗后，其IgA抗体水平随存活时间的延长而逐渐下降，在放疗后 4～22年者仅39.29％为阳性；但当病者出现肿瘤复发或转移时，阳性率又再次升至85.75％。 一、鼻咽癌与EB病毒感染的关系 小结：流行病学、血清学和分子生物学的资料证实, EBV感染与NPC有密切关系。 ◆鼻咽癌患者癌细胞中证实有EB病毒的DNA，经原位杂交，多数癌细胞呈EBERs阳性、核抗原（EBNA-1）阳性。 ◆鼻咽癌患者肿瘤细胞中有EB病毒，血清有一套抗EB病毒的抗体，血清中的EBV抗体水平普遍升高。 ◆ 1997年世界卫生组织在国际抗癌联盟年会上把EBV归类为第一类致癌物（特别是鼻咽癌） 。 二、EB病毒携带者与鼻咽癌病人血清中EBV抗体的不同 ◆ EBV血清学诊断利用NPC的一个特征，即患者多种EBV抗体的水平较非患者高（Werner Henle et al.,1976.）。 ◆ EBV血清学诊断已用于NPC高危人群的筛查和对NPC可疑病例的诊断。根据从70年代后期以来的研究结果，VCA-IgA检测通常被用于筛查以排除NPC的诊断 ；EA-IgA检测目前被用于NPC的确定性检测。 二、EB病毒携带者与鼻咽癌病人血清中EBV抗体的不同 检测哪种抗体？ 检测抗体哪种类型？ 1、 EB病毒的潜伏感染 上皮细胞中病毒复制→循环中的B淋巴细胞池→ 长期潜伏感染 ↑ ↑ 如果感染了无复制缺陷突变的病毒 ↑ EB病毒→感染口咽上皮细胞 ↑ 如果感染了复制缺陷突变的病毒 ↑ ↓ ↑ 待上皮细胞增生后→个别细胞死亡→EB病毒 引自: J Immmunol. 2005; 17498:4972-8 2、两种形式的EB病毒感染 ◆潜伏性感染 latent infection I型潜伏性感染: 表达EBNA1，病征为 Burkitt 淋巴瘤 II型潜伏性感染:表达EBNA1和LMP1、LM