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REACH法规第五卷译稿-12
第VII部分 .M.I.T.I.测定 (测定方法C.4-F)
VII.1 测定方法的原理
氧气被搅动的含在无机物质中的测定物溶液或悬浮液所吸收,经特别地培养,不能适应的微生物体在密闭的、呼吸运动温度25±1℃条件下,在暗处放置超过28天之后会自动进行测量。含有的二氧化碳用碱石灰吸收。生物的降解能力可以用氧气吸收量(修正空白吸收量)与理论吸收量的百分比(ThOD)来表示。初级降解的百分比也可以从补充的特殊物质在潜伏开始,
结束时用DOC分析来进行分析,计算。
VII.2 测定方法描述
VII.2.1 实验仪器
自动电子BOD尺,或带6个瓶子的呼吸运动计,每个300mL,并带有含二氧化碳吸收装置的瓶子
恒温槽,或者水浴保持温度在25±1℃以内。
过滤膜 (随意的)
碳分析仪器(随意的)
VII.2.2 无机物质的准备
准备下列储存液,用分析纯的试剂和水。
(a)磷酸二氢钾, KH2PO4 8.50g
磷酸氢二钾, K2HPO4 21.75g
十二水磷酸氢二钠 Na2HPO4·12H2O 44.60g
氯化铵 NH4Cl 1.70g
用水溶解后稀释到1升。pH值保持在7.2
(b)七水硫酸镁 MgSO4 22.50g
用水溶解后稀释到1升。
(c) 氯化钙 CaCl2 27.50g
用水溶解后稀释到1升。
(d) 六水三氯化铁 FeCl3·6H2O 0.25g
用水溶解后稀释到1升。
取(a)(b)(c)(d)各3mL用水稀释到1L。
VII.2.3 接受体的准备
从不少于10个的地方采集新鲜的样品,主要在那些经常使用,排放化学药品的地方,如废水处理工作,工业废水处理,河流,湖泊,海洋,采集11份煤泥,表面水土壤,水等样品,混合在一起。在除去漂浮的物质而且允许维持不变之后,用氢氧化钠和磷酸将浮在表面的pH值调整到7±1,用合适体积的浮在表面溶液的滤液填充并刺激装煤泥的容器,把溶液暴露在空气中23 1/2个小时。30分钟后,丢弃大概1/3体积的溶液,加入等体积的各含有0.1%的葡萄糖,胨,磷酸一氢钾的溶液到固定的材料中,并重新开始透气。
每天重复一次这个过程,煤泥一定要按依照作好练习操作,污水一定是洁净的,温度要保持在25±1℃,pH值保持在7±1,煤泥沉淀得很好,在空气中充分的暴露。以保证混合物时刻都是需氧性的。准备好杀原生动物药,煤泥的活动能力至少每3个月要和参照物对照一次。至少在完成1个月的操作后,才可以把煤泥拿来做接受体,但这个时间也不要长于4个月。之后,每3个月,样品来自至少10个非常规的地方。
为了保持新鲜和旧的煤泥有相同的活动能力,混合过滤浮在表面的有活力的煤泥的溶液。使用相同体积的新鲜采集的10种来源不同的样品混合物的浮在表面的滤液,如上所述将液体混合,在此单元结束18-24小时后,把煤泥拿来做接受体。
VII.2.4 烧瓶的准备
准备如下的6只烧瓶:
Nr. 1: 测定物用水稀释到100mg/L
Nr. 2,3,4: 在无机物质中的测定物100mg/L
Nr. 5:在无机物质中参照物(如苯胺)100mg/L
Nr. 6:只含无机物质
在重量和体积的基础上,直接加入溶解度很差的测定物,或按照附录III所写的进行操作,溶剂或乳化剂都不可以使用。在所有的烧瓶里填加二氧化碳吸收装置,调整烧瓶里的pH值,接近2.3,从4到7.0。
VII.2.5 测定步骤
用少量体积的接种体接种到烧瓶2,3,4(测定悬浮液),烧瓶5(活性对照组),烧瓶6(接种体空白),悬浮液的浓度在30mg/L.不要往提供物生命对照组的烧瓶1里加接种体。组装好仪器,检查空气密闭性,打开搅拌器,在黑暗的条件下开始测量氧气的吸收量,每天检查温度,搅拌器,库仑氧气吸收记录器,记录下烧瓶中组分颜色的变化,用合适的方法直接读取6个烧瓶的氧气吸收量,比如:从一个6点的图表记录,可以画出BOD曲线。在潜伏期结束时,通常是28天,测量烧瓶中组分的pH值,以算出残余的测定物和中间介质的浓度、溶解度,以及DOC的浓度(详见附录II.4)。要小心化学物质的挥发 ,如果发现有硝化作用,尽可能测算出硝酸盐和亚硝酸盐的浓度。
VII.3 数据和实验报告
VII.3.1 数据处理
在一段给定的时间后,用测定物来划分吸收的氧气量,用使
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